重组质粒pMG36e-nisI-gfp在乳酸菌中的应用

本研究将带有nisI和咖（绿色荧光蛋白）基因的乳酸菌表达载体pMG36e-nisI-gfp转化至乳酸菌中,观察其在宿主内的稳定性．对重组菌进行了菌体形态、传代培养、质粒验证等研究,考察了该质粒的稳定性．结果显示：重组菌在不含抗生素的培养基中连续传代20代后,质粒丢失率低;菌体大小和形态基本不变;质粒经HindⅢ酶切后大小不变;GFP在第0、5、10、15和20代宿主菌中都可以表达,表达量没有明显差别,在SDS-PAGE中的带型一致;初步的动物实验验证了该质粒作为遗传标记的应用效果．说明该质粒在宿主菌中具有良好的稳定性．     

增加ccaR基因剂量提高棒状链霉菌克拉维酸产量的研究

CcaR蛋白对棒状链霉茵(S.clavuligerus)中克拉维酸的合成具有正调控作用,由ccaR基因编码.PCR获得包含ccaR完整基因及其上下游一定区域的扩增产物,构建重组质粒pSET152-ccaR并转化大肠杆茵ET12567/pUZ8002后,通过属间接合转移至棒状链霉菌B71-14中.pSET152含有attP位点,可以与链霉菌基因组中的attB住点特异性同源整合,将重组质粒pSET152-ccaR携带的ccaR插入到S.clavuligerusB71-14染色体中的attB位点,实现了在S.clavuligerusB71-14基因组中增加一个拷贝ccaR基因的目的,所得的突变株S.clavuligerusB71-14:ccaR产酸量可达821.92 mg/L,是出发菌株的1.54倍.     

胰蛋白酶的固定化及其性质的研究

以大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D380为载体，以戊二醛为交联剂，固定化胰蛋白酶。研究了交联剂浓度、交联时间、交联温度、酶液的pH值等条件对活力回收率的影响，并研究了固定化胰蛋白酶的性质。     

植物乳杆菌MA2对大鼠血脂代谢的影响

评价西藏Kefir蹶植物乳杆菌MA2体内降胆固醇的功效.饲喂大鼠高胆固醇饲料的同时,灌胃Lactobacillus plantarum MA2活菌制剂(1011 cells/dper rat).实验结果显示,植物乳杆菌MA2显著降低了大鼠血清总胆固醇(TC)、低密度胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)的水平,但是对高密度胆固醇(HDL-C)的水平并没有显著影响.另外,该制剂还显著降低了肝胆固醇和甘油三酯的含量,却明显提高了粪便中胆固醇和甘油三酯的含量.研究证明了植物乳杆菌MA2具有降血脂的益生菌应用潜力.     

不同蛋白质及其水解物抗突变性的初步研究

采用伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变试验，研究酪蛋白及其水解物对化学诱变剂叠氨钠所引起的突变的抑制作用，并与麦胚蛋白，大豆蛋白进行比较，实验结果表明，酪收产解产物抗突变性随使用浓度的增加而增强，并与水解时间相关。     

嗜酸乳杆菌高密度培养及发酵剂的研究

研究了嗜酸乳杆菌的高密度培养条件,并使用喷雾干燥法对嗜酸乳杆菌粉末发酵剂进行了制备。实验表明,嗜酸乳杆菌6012的最佳增菌培养基为：乳清培养基＋0．6％（w／v）低聚异麦芽糖＋0．6％（w／v）黄豆粉＋10％（v／v）胡萝卜汁＋0．5％（w／v）CaCO3,在培养过程中伤脑筋20％柠檬酸钠调节培养基pH值为6．2,37℃静置培养18h,活菌数可达1．0×10^9 cfu/mL。以0．5％甘油＋0．5％葡萄精＋3％大豆分离蛋白＋2％海藻酸钠作为抗热保护剂,菌体经过喷雾干燥,其发酵剂活菌数为8．0×10^9 cfu／g。     

碱性蛋白酶水解蚕豆蛋白的条件优化

采用碱性蛋白酶酶解蚕豆分离蛋白,通过正交试验确定最佳酶解反应条件:反应温度为50℃,pH值为8.5,酶与底物比为16000 U/g,底物浓度为60g/L.在此条件下,水解度可以达到15.55%.     

马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种real-time PCR检测方法的建立与应用

本研究建立了一种特异性实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）检测方法,根据模式菌株马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的16S rDNA序列和全基因组序列设计筛选特异性引物,采用SYBR Green I荧光染料建立real-time PCR方法,并对方法的特异性、灵敏度、重复性和混合体系等进行检测。结果表明,本研究所建立的方法特异性强、灵敏度高、重复性好,建立real-time PCR的标准曲线,其决定系数R2为0.965,具有良好的线性关系,且在马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种及混合体系中可以特异性检出。综上,本研究建立的real-time PCR法可以快速、准确地检测马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种,为马乳酒样乳杆菌的特异性定性定量检测提供了一种新的方法。     

基于主成分分析玫瑰露酒感官特征与偏好性关系

为研究玫瑰露酒中决定消费者接受度的相关指标与玫瑰露酒感官特征之间的相互关系,测定市售玫瑰露酒的还原糖、可溶性固形物及其与青年人群偏好性,绘制玫瑰露酒风味剖面图,利用主成分分析（principal component analysis,PCA）及皮尔森（Pearson）相关性分析对所得数据进行研究。可接受度（n=50）试验结果表明,青年人群的偏好性更倾向于在花香、甜味、甜香、协调、顺滑等感官上突出的M1、M2酒样;而与醇香、苦味、酸味、涩感相关的B7、M8、M9、M10酒样,青年人群对其可接受度较低。在对市售玫瑰露酒的选择中,青年人群更偏好于具有良好口感和芳香性的玫瑰露酒。     

毕赤酵母表达不同拷贝数风味肽的呈味性比较

应用毕赤酵母发酵表达不同串联拷贝牛肉风味肽（4BMP、8BMP、12BMP、16BMP）.分别以不含风味肽的发酵液和牛肉汤作对照,经过美拉德反应制备牛肉香精.对不同串联拷贝数的BMP制备的牛肉香精风味特性进行感官评价.结果显示：由不含BMP的发酵液制备的牛肉香精特征味不明显,总体肉香味弱;由牛肉汤制备的牛肉香精特征味明显,但强度弱;以含多拷贝BMP发酵液制备的牛肉香精肉香味和特征味明显.其中4BMP总体香味不和谐;8BMP、12BMP、16BMP牛肉特征突出,肉香味明显,且权重评分方差分析显示3种多肽制备的牛肉香精总体风味无显著性差异.所以,BMP作为基料进行美拉德反应可以提升产物的牛肉特征味和总体肉香味,而拷贝数的增加对风味的影响并不显著.