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为能快速经济地获取小干扰核糖核酸 (small interfering RNA siRNA),设计采用特异性延伸引
物和上游、下游两条通用引物,通过重叠延伸一步聚合酶链反应(PCR)法一次性快速、简捷地制备包含U6
+1、H1或tRNAVal在内的三种人小RNA多聚酶III启动子 小发夹状RNA(shRNA)表达框.用该方法制备的增
强型绿色荧光蛋白(EGFP)特异性三种启动子 shRNA表达框在转染HepG2细胞后有效地抑制了EGFP转基因
表达,其中以tRNAVal shRNA表达框抑制效果最显著,且未检测到干扰素应答基因2'5'OAS mRNA的表达,
表明该表达框可被有效转染并启动产生特异基因的RNA干扰效应,进而用于快速筛选最佳siRNA位点及其最
适搭配启动子. 相似文献
物和上游、下游两条通用引物,通过重叠延伸一步聚合酶链反应(PCR)法一次性快速、简捷地制备包含U6
+1、H1或tRNAVal在内的三种人小RNA多聚酶III启动子 小发夹状RNA(shRNA)表达框.用该方法制备的增
强型绿色荧光蛋白(EGFP)特异性三种启动子 shRNA表达框在转染HepG2细胞后有效地抑制了EGFP转基因
表达,其中以tRNAVal shRNA表达框抑制效果最显著,且未检测到干扰素应答基因2'5'OAS mRNA的表达,
表明该表达框可被有效转染并启动产生特异基因的RNA干扰效应,进而用于快速筛选最佳siRNA位点及其最
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