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用PCR技术扩增了人热激蛋白27(Hsp27)基因,构建了原核表达载体pGEX-4T-1-Hsp27。经IPTG诱导表达了带有GST标签的重组人Hsp27,SDS-PAGE鉴定显示该重组蛋白的分子量为44 kD。利用谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和层析纯化了该重组蛋白,经串联质谱检测证明了该重组蛋白为人Hsp27。本研究为制备Hsp27抗体及进行Hsp27的功能研究奠定了基础。 相似文献
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p38MAPK抑制剂增强阿霉素抑制乳腺癌细胞增殖的体外研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,经阿霉素及阿霉素联合p38MAPK抑制剂(SB20580)作用细胞,通过MTT法测定细胞存活率、光学显微镜观察细胞形态变化。实验数据显示相同药物浓度下,SB20580可以明显降低MCF-7细胞存活率。结果表明p38MAPK抑制剂可以促进阿霉素抑制细胞增殖的效果。 相似文献
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采用RNA干扰的方法,通过稳定转染表达靶向雌激素受体α的shRNA的载体,由ERα阳性的乳腺癌细胞系(MCF-7)构建出稳定ERα敲减细胞株,同时构建转染了阴性对照载体的细胞株用作对照.类胰岛素生长因子-I处理稳定雌激素受体α敲减细胞株以及对照细胞株,双向电泳技术分析两种细胞蛋白质组的差异,胶内酶解结合质谱技术鉴定差异表达的蛋白质,在选择的27个差异表达蛋白中,经检验最终确定了11种差异表达显著的蛋白.这是第一次用蛋白质组学方法研究雌激素受体α在IGF-Ⅰ/IGFR信号通路中的作用,研究结果为理解雌激素和IGF-Ⅰ这两个最重要的促乳腺癌分裂因子之间的相互作用提供了线索. 相似文献
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为解决层流流量计(LFM)线性度不佳的问题,提出了一种微小缝隙式LFM,并介绍了层流流量计的测量原理、结构设计及参数计算。对一台设计流量范围约为0~280 mL/min的试验件进行了试验,试验中使用的标准装置为活塞标准装置,合成不确定度为0.12%,扩展不确定度为0.24%(k=2)。试验结果显示,在未使用任何修正系数的前提下,试验件最大引用误差为-0.90%。试验件基本达到准确度1.0级的设计指标,量程比10∶1。此外试验件线性度优良,其Re_(max)d_e/l值为3.42,大于传统要求的2~2.5,说明此结构设计可有效克服突扩突缩带来的非线性影响。 相似文献
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Hsp27高表达和低表达乳腺癌细胞的比较蛋白质组学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以Hsp27高表达的乳腺癌细胞株MCF-7为亲本,分别通过导入靶向Hsp27的shRNA敲减载体和对照空载体的方法,构建了Hsp27敲减细胞株和相应对照细胞株.然后对对照细胞株与Hsp27敲减细胞株3B2进行了比较蛋白质组学研究,结果发现在双向凝胶电泳的差异蛋白质表达谱上,共有7个明显差异蛋白点,经过MALDI-TOF-TOF质谱分析和数据库搜索,共鉴定出了4个差异蛋白点,它们分别是Hsp27和另外2种差异表达的蛋白OVCA2和PYRG2.本实验构建了Hsp27敲减的稳定细胞模型并为进一步了解Hsp27的生物学功能提供了新的线索. 相似文献
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提出了信息缺失条件下的相互依存网络抗毁性分析方法.首先,提出了结构信息和攻击信息,在结构信息已知的情况下利用信息广度参数和信息精度参数将攻击信息的获取抽象成无放回不等概率抽样问题,以此建立攻击信息缺失模型;然后,借助生成函数和渗流理论的思想提出了在随机信息缺失和优先信息缺失条件下的相互依存网络的抗毁性分析模型.根据此模型可以得到不同情况下的渗流阈值.通过以无标度网络作为实例进行进一步的实验发现信息广度参数和信息精度参数对相互依存网络的渗流阈值影响巨大,并且信息精度比信息广度影响更大,少量的高精度节点信息等价于大量低精度节点信息;已知少量最重要的节点就可以很大程度上降低相互依存网络的抗毁性;即使是在信息缺失的条件下,相互依存网络的抗毁性依旧远低于单层网络. 相似文献