云南宾川脐橙蔗糖转运基因的克隆和表达分析

蔗糖不仅是植物光合作用的主要产物,也是植物体内运输的主要物质和许多果实中糖积累的主要形式,对果实品质的形成有重要影响.在蔗糖合成的路径中,蔗糖合成酶(Sucrose Synthase)和蔗糖磷酸合成酶(Sucrose phosphate Synthase)是蔗糖代谢的关键酶.在前人报道苹果蔗糖转运基因的基础上,对云南宾川脐橙蔗糖转运基因进行克隆和表达分析,并对其相关的生理生化指标(蔗糖等糖含量、蔗糖合成代谢相关酶活性等)进行测定.研究结果显示,在宾川脐橙果实接近成熟时蔗糖转运基因的表达量最高,成熟脐橙中果肉的蔗糖含量比果皮中高,而成熟脐橙果肉和果皮中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶的活性差异不显著.     

鹅膏毒肽类毒素检测方法的研究进展

在蘑菇中毒事件中,90%的死亡是由含鹅膏毒肽类毒素的蘑菇引起的,鹅膏毒肽中毒目前尚未发现特效解毒剂,因此掌握鹅膏毒肽的快速检测技术和方法显得尤为重要。该文在介绍鹅膏毒肽的分子结构、理化性质及其对人类影响基础上,对目前国内外鹅膏毒肽的快速检测方法进行了综述,常规的检测方法包括酶联免疫吸附法、侧流免疫层析法、高效液相色谱法、液相色谱与质谱联用法及利用超分支滚环扩增技术和分子印迹技术等。这些检测方法在不同实验环境下会表现出不同的优缺点,也各有其适用条件,如有些检测方法适用于快速检测蘑菇样品,而有些更适用于现场检测。通过对比这些方法的优缺点,可对实验室或临床建立更方便、快速、灵敏检测鹅膏毒肽的方法提供重要参考依据。     

鼠CCL5蛋白的原核表达与纯化

趋化因子(CCL5)是由正常T细胞分泌的典型的具有趋化活性的细胞因子,分子量8kD,属于CC型趋化因子的β家族成员之一,并调控T淋巴细胞的活性和分泌能力.本研究旨在克隆小鼠趋化因子CCL5基因并在原核表达系统中实现表达,获得与His标签融合的重组趋化因子mCCL5蛋白,并测定其在体外的趋化活性.将趋化因子CCL5基因扩增并插入pET-28a原核表达载体,转化至Rosetta感受态细胞中.重组mCCL5蛋白以IPTG诱导表达,再以Ni-NTA纯化系统进行纯化.Transwell实验检测重组CCL5蛋白的趋化活性.结果显示pET-28a-mCCL5原核表达载体成功构建,mCCL5蛋白在细菌中大量表达并主要以包涵体的形式存在.表达产物以SDS-PAGE和免疫印迹鉴定,Transwell实验证实趋化因子能够显著促进巨噬细胞RAW264.7细胞的迁移.带有His标签重组鼠趋化因子CCL5的成功表达,为下一步CCL5抑制剂的筛选奠定基础.     

番茄果实成熟基因Sl0658的功能研究

Sl0658属于NAC转录因子家族.本研究克隆了Sl0658的C-端特异性末端序列,利用农杆菌介导法将特异性片段导入受体番茄中进行遗传转化,获得干涉表达的转基因番茄.对转基因番茄果实成熟相关指标(包括果实乙烯释放量、果实呼吸速率、果实硬度、可溶性固形物含量等)和果实成熟相关基因表达量进行测定.研究结果显示,Sl0658干涉转基因番茄果实呈现黄色、乙烯释放量和呼吸速率显著降低、果实硬度提高、部分成熟基因表达量降低.表明Sl0658在调控番茄果实成熟过程中发挥重要作用.     

狂犬病毒磷蛋白的生物信息学分析及其真核表达

为了探讨运用蛋白全长和多肽抗原制备抗狂犬病毒磷蛋白抗体的可能性,本研究运用生物信息学专业软件对二级结构、表面可及性、亲水性和抗原指数进行综合分析,并预测出狂犬病毒磷蛋白的抗原表位.分析结果表明,抗原表位主要位于狂犬病毒磷蛋白的区段14-37、39-66、70-91、106-114、134-158、161-173、187-201、207-221、229-234、236-244、249-258、278-297及以上区段附近.同时,本研究构建了狂犬病毒磷蛋白基因的真核表达载体,转染细胞进行真核表达后,能够被抗狂犬病毒阳性血清所识别,说明磷蛋白上存在大量有效的抗原表位.多个参数对狂犬病毒磷蛋白的抗原表位的预测,为进一步开展狂犬病毒磷蛋白的单克隆抗体制备、结构特征以及表位鉴定工作奠定理论基础.     

乌鲁木齐市土壤中氡浓度水平及分布规律调查

为摸清乌鲁木齐市土壤中氡浓度水平及分布规律,采用网格布点、GPS定位、RAD7电子测氡仪,于2008年6～9月期间对乌鲁木齐市土壤氡浓度进行了调查。结果表明,在所测量的市区内100个点位中,土壤中氡浓度范围为45～41164Bq/m3,平均值为3288Bq/m3;氡浓度呈现南部高、北部低的变化趋势;不同类型土壤中氡浓度有所不同,浓度由高到低依次为:黄土(沙土)>砂土>泥土>砂石地。     

乌鲁木齐地区居室内氡浓度影响因素再研究及防治对策探讨

在前期研究的基础上,对乌鲁木齐地区室内氡浓度的空间分布规律、以及室内氡在不同建筑构成、墙体建筑材料、室内装修程度及开窗习惯间的分布差异等进行了再研究,综合乌鲁木齐地区住宅内氡浓度的影响因素,有针对性的提出了乌鲁木齐地区的已建住宅的降氡措施和新建住宅的防氡措施。