电泳制备家蝇幼虫抗菌肽及其性质

通过体壁损伤法诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴，经沸水浴热变性，透析浓缩处理，后经Tricine—SDS—PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达带，将该条带电泳回收，复性，抗菌活性检测等步骤，分离纯化得到3种抗菌肽：MDL—1、MDL—2、MDL—3，研究结果表明：MDL—1分子中富含Gly，相对分子质量为6200，对革兰氏阴性菌E.coli有较强抗性；MDL—2分子中富含Pro，相对分子质量为11000，对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S．aureus均有抗性；MDL—3分子中富含Gly，相对分子质量为14000，对革兰氏阳性菌S．aureus有较强抗性；3种抗菌肽具有很强的温度耐受性，均没有凝血活性和溶血活性，同时电泳制备抗菌肽的实验方法为此类微量生物活性物质的分离纯化提供了有效的途径。     

乳酸杆菌肽聚糖的分离鉴定及其免疫活性

研究了乳酸杆菌细胞壁肽聚糖的分离、鉴定及其对肽聚糖生物活性的影响，实验获得了SDS处理粗细胞壁的适宜条件为SDS质量浓度8g／dL，处理时间为沸水浴10min，SDS结合胰蛋白酶和TCA处理，可有效去除乳酸杆菌中的非共价结合蛋白质及共价结合蛋白质，经化学分析鉴定，所提取的乳酸杆菌成分为肽聚糖，肽聚糖中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸浓度分别为1．181，0．943，0．770和0．456mmol／g，是肽聚糖中的组分氨基酸，SDS结合TCA处理，方能较有效地去除DNA，TCA处理是去除细胞壁磷壁酸、脂磷壁酸的有效方法。此外，小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验、C3b受体实验以及血清溶菌酶活力实验证实，所分离纯化肽聚糖的免疫学活性未受影响。     

营养基因组学研究与应用

营养基因组学是高通量基因组技术在日粮营养素与基因组互作及其与健康关系研究中的应用．随着人类和模式动物基因组的阐明以及近年有关技术的进展，同时进行生物样品中DNA，mRNA和表达的蛋白质分析，确定基因的多样性已成为可能．它将加速认识营养如何影响代谢途径和机体稳态控制，发现与营养有关疾病早期调节失控与基因型的关系．应用营养基因组学建立评价营养素利用效率的标识和方法，可为公众健康提供有效的科学依据．利用营养基因组学技术能够提高产品质量与生产效率，促进食品工业发展和开拓新的市场．     

外源质粒DNA对小鼠肝脏基因表达谱的影响

研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收可能对肝脏产生的作用机制。给Balb／c小鼠灌胃质粒pcDNA3 200μg，在灌胃后4h分离肝脏，提取肝脏的总RNA。利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb／c小鼠肝脏进行基因表达谱研究。结果发现17664个基因中，表达上调100条，表达下调41条。按基因功能分类，表达上调的基因可分为免疫应答基因、转录因子基因、信号转导基因、转运相关基因及代谢相关基因等；表达下调的基因主要为脂质代谢基因。灌胃外源质粒DNA后，肝脏组织主要表现为急性时相反应的加强、免疫反应的活化、细胞信号通路的活化以及脂质代谢途径的抑制。表明外源质粒DNA通过胃肠道途径可广泛调控肝脏的基因表达。     

VC新剂型——脂质体的制备及性质初探

介绍了用薄膜法、改冰冻熔融法、复乳法分别制备脂质体的方法,其中以薄膜法和改良冰冻熔融法对VC的包裹效果为佳,其包封率达到17．2％和12．8％。还研究了影响脂质体包封率的一些因素,如各原料的比例、超声处理的时间等,并对脂质体的稳定性作了一些探讨。     

模拟酶解大豆7S、11S蛋白及其抗氧化活性的研究

以"活性肽搜寻与蛋白模拟水解系统"为工具,选择碱性蛋白酶和中性蛋白酶对大豆7S、11S蛋白进行模拟水解,得到不同水平的抗氧化肽肽段,以重均分子量为手段,评价理论模拟与实验水解的相关性;以还原力、清除二苯代苦味酰基苯肼(DPPH·)自由基能力比较以上蛋白酶水解物的抗氧化活性.结果表明:模拟与实验水解得到的分子量分布在比例以及重均分子量方面有显著相关性(P<0.01);四种酶解产物均具有一定的抗氧化活性,其中,以7S蛋白的碱性蛋白酶产物表现出最高的还原力和DPPH·清除能力(P<0.05).     

超声波对胰蛋白酶水解酪蛋白的影响

研究了超声场下胰蛋白酶水解酪蛋白的酶解反应条件与动力学.在超声波频率 20 kHz、作用与间歇时间比为1∶1时,测定了不同功率下胰蛋白酶活性及该酶的最适温度、最适 pH和米氏常数Km 的影响.结果表明,180,225 W功率下,超声10 min的酪蛋白水解率显著高于常规对照组(P<0.05); 225 W超声功率下,在5 ℃,10 ℃,20 ℃下水解率分别比对照组提高 4.4 倍、2.47倍和2.33倍(P<0.01);超声场下胰蛋白酶 Km 值减小,Vm 增大.将胰蛋白酶、底物分别进行超声处理,紫外和荧光光谱分析观察到,超声处理后,酶溶液荧光发射光波长从334 nm移至332 nm,荧光强度提高,表明一定的超声波可能使酶及底物分子构象发生变化,提高胰蛋白酶水解活性.     

杨梅酮对高脂诱导的肥胖小鼠脂肪肝的预防作用

研究杨梅酮(Myricetin,MTN)对高脂诱导的肥胖小鼠脂肪肝的预防作用。32只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组:对照组(CT,饲喂正常日粮),对照+杨梅酮组(CT+MTN,饲喂含质量分数0.2%杨梅酮的正常日粮),高脂组(HF,饲喂高脂日粮),高脂+杨梅酮组(HF+MTN,饲喂含质量分数0.2%杨梅酮的高脂日粮)。10周后测定小鼠代谢差异(能量消耗、呼吸交换率、自主活动),血脂水平,肝脏氧化还原状态及脂质沉积情况,同时采用q PCR检测小鼠肝脏脂质代谢相关基因的表达。结果表明与对照组相比,长期高脂日粮导致小鼠体质量显著增加,内脏脂肪沉积,能量消耗显著降低(P0.05)。肝脏发生氧化应激,表现为MDA显著上升,GSH-Px、SOD、CAT、GSH显著下降(P0.05)。肝脏脂肪变性,肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)水平均显著高于对照组,脂质合成相关基因(Acc1、Fasn、Srebf1)显著上调,脂肪酸氧化相关基因(Cpt1α、Pparα)显著下调。高脂日粮基础上添加杨梅酮能够恢复肝脏TG、TC、FFA水平及肝脏脂质代谢相关基因(Acc1、Fasn、Srebf1、Cpt1α)的表达,同时维持肝脏的氧化还原状态。因此,推测杨梅酮可能通过维持肝脏氧化还原状态,促进能量消耗,调节肝脏脂质代谢,预防脂肪肝的发生。     

不同聚合度低聚木糖体外清除自由基活性研究

通过研究不同聚合度的粗低聚木糖(LL、ML、HL)及其中所含的木糖对羟自由基(·OH)清除活性的影响,对纯低聚木糖的平均聚合度与活性间的关系进行了评价。实验结果表明.粗低聚木糖对羟自由基(·OH)具有较好的清除活性。其中。高聚合度的粗低聚木糖(HL)对羟自由基(·OH)的清除活性最显著,IC_(50)约为14 mg/mL.而木糖对羟自由基(·OH)无清除活性,说明纯低聚木糖的平均聚合度越高,清除羟自由基(·OH)作用越显著。对木糖及不同聚合度粗低聚木糖+DPPH自由基进行紫外扫描.探讨纯低聚木糖对DPPH自由基的清除作用,结果表明,木糖及纯低聚木糖对DPPH自由基均没有清除能力。     

重组阿片肽包涵体的溶解工艺

通过SDS PAGE凝胶电泳确定了目的重组阿片肽存在于包涵体中,系统研究了影响大肠杆菌表达的重组阿片肽包涵体溶解的因素,确定了重组阿片肽包涵体制备溶解的最佳工艺条件,即菌体超声破碎5min,间隔时间6s,破碎效果最好;包涵体洗涤温度为4℃,尿素洗涤液的浓度为2mol/L,洗涤时间7～8h,8mol/L的尿素溶液对包涵体进行溶解,蛋白质质量浓度约为600μg/mL,其效果最佳.