混合菌的构建及其对3,4-二氯苯胺的生物转化

从染料废水中分离出以3,4-二氯苯胺（3,4-DCA）为唯一碳源和能源生长的革兰氏阴性菌，筛选其中两株形态差异较大的菌株P11-1和L13构建混合菌群，用于3,4-DCA的转化实验以消减其毒性。通过优化两株菌配比构建混合菌群，3,4-DCA转化率达73.33%，明显高于单菌。经菌株形态观察和16S rDNA序列分析，确定两株菌均为铜绿假单胞菌。以单因素实验考察混合菌群在3 d内对100 mg/L 3,4-DCA的转化能力，并通过正交实验进一步优化转化条件，得出最佳条件组合为：接菌量3%（体积分数），温度30 ℃，pH=8.0，摇床转速190 r/min，在此条件下转化率达89.26%，其中pH对菌群转化能力影响最大。GC-MS分析菌群代谢产物主要为3,4-二氯乙酰苯胺，酶活分析发现了较高的N-乙酰基转移酶（NAT）活性，即菌群通过乙酰化对3,4-DCA进行解毒。     

一株木质素降解细菌的筛选及其降解途径

经高温碱性盐法预处理的玉米秸秆预处理液中木质素和碱性盐含量高,为了反复利用含盐预处理液,需脱除其中的可溶性木质素。本实验从腐木中筛选分离到一株木质素降解菌株CCZU-WJ6,通过形态学观察和16S rDNA序列分析,鉴定该菌株属于无色杆菌属（Achromobacter sp.）。测定了CCZU-WJ6木质素降解相关酶的活性,及其在玉米秸秆预处理液中的生长趋势、预处理液的COD去除率和木质素降解率,通过GC-MS和FTIR检测预处理液中组分及其化学键的变化。通过单因素实验确定了菌株CCZU-WJ6处理预处理液的最佳条件为pH 7.0、温度30℃、预处理液稀释倍数10倍、接菌量0.5g/mL。在处理6天后,预处理液COD脱除率为40.9%,木质素的降解率为32.1%,CCZU-WJ6分泌木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶的酶活分别达到215.5U/L、200.1U/L。CCZU-WJ6会破坏木质素结构中的苯环结构、醚键以及C＝O键,降解产物中含有愈创木酚和对香豆酸,推断其降解途径为β-芳基醚代谢途径和阿魏酸代谢途径。CCZU-WJ6可用来处理含木质素的工业废水,在工业方面具有广阔的应用前景。