黄杆菌肝素酶Ⅱ的克隆与表达

目的克隆并表达黄杆菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)的基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增出黄杆菌HepⅡ的基因,经验证后插入到表达质粒pET-28a上构建表达载体,重组质粒转化E.coli BL21(DE3)进行蛋白质表达。结果成功地将PCR扩增得到的测序正确的HepⅡ基因构建入pET-28a载体上,重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达产物经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定得到目的蛋白,测活显示重组HepⅡ具有活性。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepⅡ基因。     

长株潭GNSS连续运行参考站系统

介绍了长株潭GNSS连续运行参考站系统（CZTCORS）的建设以及系统测试的精度与方法,同时对系统的特点及关键性技术进行了阐述,表明该系统完全达到和超过设计要求,并解决了实时坐标转换的难题。     

浅析羊(兔)毛衫的成衫染色

本文介绍了由锦纶、羊毛、兔毛三种纤维纺织而成的羊(兔)毛衫的成衫染色的特点,分析了这三种纤维的染色特性,讨论了影响染色效果的主要因素,并对不同比例的羊(兔)毛衫做了大量的染色试验.试验结果表明:染相同颜色时,染料的用量随兔毛含量的增加而增加.本文还提供了4例羊(兔)毛衫成衫染色的参考工艺.     

基于GIS的"第五届城市运动会专题图"的编制

文中主要阐述了第五届城市运动会专题图的编制设计思想、技术特点，以及专题图的编制方法。该方法受到了各界的肯定和欢迎。     

黄杆菌肝素酶Ⅰ基因的克隆与表达

目的 克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因.方法 通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒Pet-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性.结果 PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到Pet-22b表达载体中.重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS.PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600.结论 克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因.     

黄杆菌肝素酶I基因的克隆与表达

目的克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS-PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。     

三维GIS在“数字长沙”中的应用实例

本文就三维GIS在“数字长沙”中的应用进行了探讨，阐述了利用三维GIS为长沙市政府区域建立三雏全信息模型的结构、主要功能及应用。     

多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白的原核表达及其生物活性

目的原核表达多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性。方法应用PCR法扩增Arg9-VP3序列,与载体pET-43.1a连接后,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+-NTA纯化后,进行肠激酶裂解、超滤浓缩,并检测其生物活性。结果重组表达质粒pET-43.1a-Arg9-VP3经酶切鉴定和序列分析,证明构建正确。转化E.coliBL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达。纯化的融合蛋白纯度达90%以上,可抑制HeLa细胞增殖。结论已成功地在大肠杆菌中表达了多聚精氨酸蛋白转导域-凋亡素融合蛋白,纯化的融合蛋白具有诱导HeLa细胞凋亡的能力。     

TAT-凋亡蛋白质制备与抗肿瘤活性研究

目的制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性。方法将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转入E.coliBL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性。结果30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上。MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(IC50=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%。结论大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应。     

TAT-凋亡蛋白质制备与抗肿瘤活性研究

目的 制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性.方法 将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转/N.E.coli BL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的 蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性.结果 30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500 mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上.MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(ICso=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%.结论 大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应.