人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润中双氢青蒿素抑制作用的研究

目的：研究双氢青蒿素（Dihydroarteminin,DHA）对人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润的影响并对其机制进行探讨。方法：通过划痕愈合试验、Traaasweu穿梭试验、人工基质胶浸润试验,检测DHA对143B细胞的转移迁徙能力的影响;WesternB｜oting检测与人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润密切相关的两种蛋白：基质金属蛋白酶（MatrixMetalProteinase9,MMP-9）和血管内皮生长因子（VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF）,经DHA作用后表达的影响。结果：划痕愈合试验、Transwdl穿梭试验和基质胶侵袭试验结果均呈现阳性,表明DHA可有效地抑制人骨肉瘤细胞143B的转移与浸润;westerlaBloting结果显示MMP-9和VEGF的表达受到明显抑制,抑制效果随着其浓度增大和时间延长而增加。结论：双氯青蒿素具有明显的抑制人骨肉瘤细胞143B的转移和浸润的作用,可能与双氢青蒿素能抑制MMP-9和VEGF表达有关。     

利用生物信息学方法挑选MCPH1基因标签单核苷酸多态性（tag-SNPs）位点

目的：为考察汉族人群MCPH1基因与原发性小头畸形病的关系,利用生物信息学方法挑选汉族人群中的MCPH1基因标签单核苷酸多态性（tag-SNPs）位点。方法：利用NCBI数据库,确定MCPHl基因研究范围：利用Hapmap数据库获取汉族人群的MCPHl基因SNPs数据;应用Haploview4.2对MCPH1基因进行连...     

双氢青蒿素对骨肉瘤细胞143B影响的研究

目的：研究双氢青蒿素（Dihydroatemisinine,DHA）对人骨肉瘤细胞143B的影响及所导致的形态学变化。方法：采用人骨肉瘤143B细胞株,通过设置对照组和低浓度、中浓度、高浓度的DHA组,H．E染色观察Trandwell小室穿梭能力;划痕愈合实验观察迁移能力;Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡;MTT法检测细胞增殖抑制能力。结果：DHA表现出明显地抑制人骨肉瘤143B细胞的迁移、增殖以及促进凋亡（P〈0．05）,且伴随浓度的递增和时间的延长,抑制作用更明显。结论：DHA具有较强的抗入骨肉瘤作用,其机制可能与DHA诱导骨肉瘤细胞凋亡,并抑制其增殖有关。     

cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9诱导小鼠间充质干细胞成骨分化中的作用

目的探讨cAMP-PKA-CREB信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法将C3H10T1/2细胞分别加入不同浓度的cAMP-PKA-CREB信号通路抑制剂H89(1、2.5、5和10μmol/L),检测其对碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响;通过ALP定量和钙盐沉积试验分别检测H89对BMP9诱导C3H10T1/2细胞早期和晚期成骨分化的影响;经Western blot法检测H89对C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、骨钙素(Osteocalcin,OCN)和成骨关键转录因子Runx2表达水平的影响;通过Wentern blot及荧光素酶活性的检测,观察H89对经典信号通路BMPs-smad1/5/8的影响。结果随着H89浓度的增加,对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP的抑制作用明显增强(P0.05),且呈剂量依赖性;ALP定量和钙盐沉积试验结果表明,H89可明显抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早期及晚期成骨分化;H89可显著抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中磷酸化CREB、OCN及Runx2蛋白的表达(P0.05),与AdBMP9组比较,H89对经典BMPs-smad1/5/8信号通路无明显影响(P0.05)。结论阻断cAMP-PKA-CREB信号通路可抑制BMP9诱导的MSCs C3H10T1/2的成骨分化,为BMP9的临床应用奠定了理论基础。