超氧化物歧化酶的固定及其活性检测

目的探讨超氧化物歧化酶(SOD)的固定及固定化SOD活性的检测方法。方法以淀粉为载体,对SOD进行固定,采用改进的邻苯三酚测活法(以Vc为终止剂),并结合过滤或离心的方法去除沉淀,测定固定化SOD的活性。比较过滤法与离心法,及过滤法与经典邻苯三酚法测定酶活性的差异,并检测过滤法的线性、精密性和准确性。结果过滤法检测SOD活性的精密性较离心法高,与经典邻苯三酚法检测结果差异无统计学意义,在SOD浓度为6~60μg/ml范围内,SOD活性值与浓度线性关系良好(r=0.999 5),精密性及准确性良好。固定化SOD的比活性为1 730.07 U/g,酶活回收率为53.3%。结论以淀粉为载体固定化SOD效果好,经改进的邻苯三酚法可用于固定化SOD的活性测定。