蜗牛黏液活体提取及成分特性分析

白玉蜗牛为陆生贝壳软体动物,繁殖迅速,易于饲养,综合利用价值高。白玉蜗牛在爬行中分泌大量黏液,其中含丰富的天然胶原质、弹力蛋白、尿囊素、蛋白质、多种维生素、甘醇酸,是天然的抗菌剂。本文以白玉蜗牛为研究对象,开发一种新型活体蜗牛黏液提取方法,并分析其主要成分和抑菌性。通过凯氏定氮仪测定白玉蜗牛黏液中粗蛋白含量为0.42%,冻干样品中粗蛋白含量为31.48%。采用紫外-可见分光光度法分析表明蜗牛黏液中含有胶原蛋白;红外光谱扫描结果表明:蜗牛黏液中存在Ⅰ型胶原蛋白;采用Woessner法测得白玉蜗牛黏液中胶原蛋白含量为16.69%。通过抑菌试验发现活体蜗牛黏液对志贺氏菌、猪沙门氏菌、禽巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。     

直投式酸奶发酵剂高密度培养工艺的研究

以实验室筛选获得的适于发酵生产用的直投式酸奶发酵剂菌株组合保加利亚乳杆菌Lb-23和嗜热链球菌S.t-14为材料,对其高密度培养工艺进行了研究.结果发现,按球菌:杆菌=1:1的混合培养比例,pH 6.6～6.8,转速85～100r/min,42℃培养18h后,活菌数达到1.27×10~9cfu/mL;菌悬液经1.8%海藻糖、0.25%甘油、5.5%谷氨酸钠和0.5%吐温80保护剂处理,冷冻干燥后获得的发酵剂活菌数达到3.35×10~(11)cfu/g.     

凝结芽孢杆菌复合干酪乳杆菌发酵南瓜饮料的研制

以南瓜为原料,采用切块、软化、打浆、酶解、发酵、冷藏等基本工序,在单因素试验的基础上,以活菌总数为响应值,采用Box-Benhnken设计优化发酵南瓜饮料工艺条件。结果表明,南瓜汁经纤维素酶、果胶酶、糖化酶复合酶解,可获得发酵性糖为22.78 g/L的南瓜汁发酵醪液,以3%(V/V)的接种量接种凝结芽孢杆菌CGMCC9951,培养16 h后再以相同接种量接种干酪乳杆菌LC102,进行8 h偶联发酵,最终获得活菌总数为3.072×10~9CFU/m L,凝结芽孢杆菌为1.89×10~9CFU/m L,且富含39.8 mg/Lβ-胡萝卜素,1.5%南瓜粗多糖,0.14 mg/mL Vc,0.115 mg/mL多酚,以及含有γ-氨基丁酸、谷氨酸等18种氨基酸(包含8种必需氨基酸)的活菌南瓜饮料。     

高产L-乳酸米根霉RE3303菌株特性研究

为了获得更适于工业生产的产乳酸菌株 ,采用低能离子诱变方法 ,对出发菌米根霉PW 35 2进行改良 ,获得高产L(+) 乳酸菌株RE330 3,发酵周期为 36h ,产酸能力达 131～ 136g/L ,最高可达 14 0g/L ,体积产酸速率达 3.6 1g/ (L·h) ,产率为 86 %～ 90 % ,产酸比PW35 2提高 75 %。     

Real-time环介导等温扩增检测枣花蜜源成分

目的建立real-time环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测枣花蜜源成分的方法。方法以枣转录间隔区(internaltranscribedspacer,ITS)为靶序列,用软件PrimerExplorerV5与软件Oligo 7设计LAMP特异性引物,优化反应温度,测试灵敏度、特异性和适用性。结果所建立的方法在反应温度55℃条件下,引物特异性强,最低检测限为≥1 pg/μL大枣DNA。结论该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单等优势,适合商业枣花蜜掺假快速检测。     

转基因油菜籽PCR检测技术研究

以转基因抗草甘膦油菜籽F4—27和转基因抗草丁膦油菜籽T—21为材料,通过使用特异性引物,对转基因油菜籽常见启动子、终止子、筛选标记基因和转入目的基因等多个外源转基因元件进行采用PCR检测,以期建立一套快速、准确、高效转基因油菜籽筛查鉴定技术。     

洛阳传统绿豆酸浆工艺优化及发酵特性分析

用绿豆酸浆制成的浆面条是洛阳的传统特色小吃,采用单因素和正交试验研究绿豆酸浆的最佳加工工艺,并对其发酵过程中氨基酸、有机酸等物质的变化进行检测分析。结果表明,在料液比1:15,微生物接种量3.2×105 CFU/mL,25℃发酵24 h的条件下,得到可溶性蛋白质和可溶性固形物含量分别为36.7 g/L和1.21%,感官评分为83.9的绿豆酸浆产品。在发酵过程中,淀粉含量在发酵9 h后逐渐下降,还原糖含量在发酵过程中先上升后下降,蛋白质含量降低幅度较小。发酵24 h时,绿豆酸浆pH下降到4.3,总酸含量为13.62 g/L,乳酸是绿豆酸浆中主要有机酸。游离氨基酸含量上升至1 718.56 mg/100 mL,甘氨酸、谷氨酸、亮氨酸含量较高。结合相关性分析和主成分分析结果得出,富马酸、琥珀酸和酒石酸3种有机酸,谷氨酸、赖氨酸和苯丙氨酸等氨基酸对绿豆酸浆品质影响较大,发酵24 h时游离氨基酸综合评分最高。     

凝结芽孢杆菌CGMCC 9951新型抗菌肽的挖掘、表达及活性测定

抗菌肽是一类能够抑制食源性致病菌生长的天然生物防腐剂。为获得凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)CGMCC 9951抗菌肽,利用全基因组测序和生物信息学分析,对抗菌肽合成基因簇进行挖掘,并进行表达和活性验证。结果表明,应用antiSMASH软件共挖掘出2个抗菌肽,与NCBI数据库比对后,发现Region 3与Amylocyclicin相似度较高,后续选择Region 3进行表达。通过Expasy等软件对Region 3抗菌肽结构进行分析,发现成熟Region 3抗菌肽由64个氨基酸残基组成,分子质量为6 371.57 Da,呈带正电的疏水性蛋白;Region 3同源比对结果为环状抗菌肽,三级结构主要为α螺旋结构。为研究该肽的抗菌活性,成功在大肠杆菌中构建了含谷胱甘肽巯基转移酶标签的融合蛋白,并进行质谱验证。以单核细胞增生李斯特氏菌为指示菌,抑菌圈直径为(15.2±1.4) mm,证实表达的融合蛋白具有抗菌活性。融合蛋白的成功表达为凝结芽孢杆菌CGMCC 9951抗菌肽的进一步研究和应用奠定基础。     

真菌诱导子对纳他霉素生物合成的影响

研究黑曲霉、产黄青霉、米曲霉和酿酒酵母四种真菌诱导子对生物防腐剂纳他霉素生物合成的影响,获得具有促进作用的真菌诱导子,并对诱导子的主要作用成分和诱导机理进行初步分析。结果显示:产黄青霉代谢产物诱导子的促进作用最强,使纳他霉素产量达到1.856g/L,较原始产量0.835g/L提高了122.3%;通过优化试验得到最佳诱导条件:产黄青霉诱导子的最优培养时间为2d;在纳塔尔链霉菌发酵24h时加入,发酵至120h,纳他霉素的产量达到2.769g/L,较对照组提高了231.6%;通过有机溶剂萃取分离试验和发酵过程相关参数的检测,确证了真菌代谢产物中起主要诱导活性的是非蛋白、非多糖类的小分子物质,并且其极性与丁醇相近。