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谷氨酸脱羧酶(GAD)是生物合成γ-氨基丁酸(GABA)的关键酶,本研究通过基因工程构建了一株产GAD的重组枯草芽孢杆菌,并对其产GAD的发酵条件进行优化。分别通过单因素法、正交实验、极差分析和响应面法确定了最佳培养基成分(g/L)及发酵条件为:蔗糖23.5,豆粕10、乙酸铵为8.5、磷酸二氢钾4.1、七水硫酸镁0.5,p H7.0,培养温度37℃。在优化条件下GAD酶活达到0.413 U/m L,与优化前的GAD酶活0.143 U/m L相比,酶活提高了188.8%。本研究有助于后续开发枯草杆菌生产γ-氨基丁酸的工艺,以克服现在γ-氨基丁酸生产工艺中,大肠杆菌安全性的问题和乳酸菌成本过高的问题。 相似文献
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本研究以Mycobacterium sp.BFZ304作为实验菌株,研究了不同碳源、氮源、磷酸盐等培养基成分对Mycobacterium sp.BFZ304发酵转化植物甾醇生产9α-羟基雄烯二酮的影响。在单因素实验的基础上,以9α-羟基雄烯二酮的产量为衡量指标,采用响应面法优化了转化培养基的组成,并建立了玉米浆、葡萄糖、硝酸钠、磷酸氢二铵变化的二次回归方程,探讨了各因子对9α-羟基雄烯二酮产量的影响。最终确定最适宜的转化培养基为葡萄糖10 g/L、玉米浆40 g/L、硝酸钠6 g/L、磷酸氢二铵0.7 g/L。在此条件下,底物植物甾醇添加量为10 g/L时,9α-羟基雄烯二酮的产量可达到4.86 g/L,底物植物甾醇的转化率比优化前提高了近40%,具有极好的产业化前景。 相似文献
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研究了超微粉碎预处理技术在沙柳原料酶水解中的应用。沙柳原料经过超微粉碎处理后,通过正交实验设计优化原料的稀酸高温预处理条件,得到最佳的预处理参数为:原料粒度(15μm)、固液比1:12、温度160℃、H2SO4 0.5%、时间20min;经过预处理的沙柳原料通过混料实验设计法对纤维素酶的复配条件进行优化,得到最佳的纤维素酶系比例为:滤纸酶活(FPU):CMC酶活(IU):β-葡萄糖苷酶(IU):木聚糖酶(IU)=1.52:5.35:29.55:1,该酶系比例的纤维素酶比使用单一商品纤维素酶水解效率提高了28%以上。 相似文献
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生物柴油及其生产技术的进展 总被引:5,自引:0,他引:5
介绍了由可再生油脂原料衍生的环保燃料生物柴油在国内外应用现状,重点介绍了酯交换法制备生物柴油技术研究进展情况,展望了生物柴油产业在我国的发展前景。 相似文献
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以筛选得到的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)-聚偏氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)复合膜为分离用膜,开展了拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)ZL01丁醇发酵与渗透汽化原位分离耦合的研究,结果表明:分批发酵-渗透汽化原位分离耦合与分批发酵相比,初始葡萄糖质量浓度从50 g/L提高至90 g/L;在90 g/L的初始葡萄糖质量浓度下,发酵结束时发酵液和渗透液中的丁醇总产量从13.2 g/L提高到16.9 g/L,总溶剂(丙酮(acetone)、丁醇(butanol)、乙醇(ethanol),简称ABE)产量从17.8 g/L提高到24.3 g/L,葡萄糖利用率从59.4%提高到95.7%。另外,分离过程中膜的总渗透通量平均为705 g/(m2·h),丁醇分离因子平均为19.0;经渗透汽化分离,渗透液可直接进入下一步蒸馏阶段,其中丁醇和总溶剂ABE质量浓度分别为178 g/L和292 g/L,与分批发酵工艺中发酵液直接进入蒸馏塔相比,丁醇和总溶剂ABE质量浓度分别提高了10.9 倍和14.1 倍,可大大降低蒸馏能耗。 相似文献
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为了构建一株可以生产乙醇酸的食品安全菌株,对枯草芽孢杆菌开展了代谢改造。本研究首先利用同源重组手段将外源异柠檬酸裂解酶基因aceA整合到了枯草芽孢杆菌基因组上,构建了出发菌株164MCT-GA,然后利用代谢工程手段进行了乙醇酸合成代谢优化。结果表明,整合外源异柠檬酸裂解酶基因aceA的出发菌株164MCT-GA可以实现以甘油为底物的乙醇酸从头合成,摇瓶发酵产量为0.114 g/L;在此基础上,过表达柠檬酸合成酶基因(citA),加强前体物供应;过表达乙醛酸还原酶基因(yvcT)、敲除乳酸脱氢酶基因(ldh)、磷酸乙酰转移酶基因(pta)、乙酰-CoA转乙酰酶基因(mmgA、yhfs),从而减少碳源损失并提高乙醇酸转化率,最终得到的工程菌GA3-52,其摇瓶发酵产量为0.572 g/L,是出发菌株的5倍以上,产率为0.175 g/g甘油,本研究首次在枯草芽孢杆菌中利用乙醛酸循环进行乙醇酸的从头合成,为食品安全菌高产乙醇酸的发酵生产奠定了基础。 相似文献
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谷朊蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺优化 总被引:2,自引:0,他引:2
采用碱性蛋白酶水解小麦谷朊蛋白制备ACE抑制肽,选取酶解时间、温度、pH和加酶量4个因素进行中心组合实验设计,利用响应面法对ACE抑制肽的提取工艺进行优化研究.通过SAS软件对ACE抑制率的二次多项数学模型解逆矩阵分析表明:在酶解时间为3 h、pH 8.5、温度60℃、加酶量15mg/g时,酶解产物的ACE抑制效果最好,最大抑制率平均为93.82%,与实测值相符.利用优化工艺条件酶解小麦谷朊蛋白制备ACE抑制肽时,其抑制率比优化前提高40.7%. 相似文献