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1问题的提出岳城水库是海河流域漳卫南运河水系上的一座大型水利枢纽,控制流域面积18100km2,占漳河流域面积的99.4%。该库于1959年动工兴建,1970年建成,其主要任务是防洪、灌溉、城市供水和结合发电。原设计防洪标准为100年一遇,校核标准略高于1000年一遇,总库容为10. 相似文献
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<正> 作者应用ATCC-CD_(38)单抗(USA)与活化的Sepharose-4B株(pharmacia)偶联,用1%NP_(40)(Sigma)溶解人胸腺细胞后进行亲和层析,MgCl_2解离CD_(38)抗原。用BCA试剂(pierce)测定蛋白质浓度。用亲和层析纯化的CD_(38)抗原0.1μg/100μl于酶标板孔中4℃包被过夜。包被缓冲液为pH6.5的PBS(含0.02%NaN_3和0.5%牛血清白蛋白)。测定时板孔用含0.05%的Tween-20的Tris-HCV缓冲液(TBS-T)洗3次,然后加待测的杂交瘤细胞培养上清和阳性、阴性对照以及空白对照液100μl/孔,放37℃湿盒 相似文献
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抗转铁蛋白受体鼠源性单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 利用基因工程技术将鼠源性单克隆抗体WuT9改造成单链抗体。方法 从分泌抗CD71单克隆抗体的杂交瘤细胞WuT9中提取总RNA ,采用OligodT为逆转录引物 ,逆转录合成cDNA第一链 ,然后分别采用VL 和VH 框架区的PCR引物 ,扩增VH(重链可变区 )和VL(轻链可变区 )DNA片段 ,利用事先合成的存在于VL 下游引物和VH 上游引物的部分人工连接子重叠互补序列 ,将VL 和VH 的PCR回收产物进行部分重叠PCR(SOE) ,形成单链抗体基因。最后将此基因重组进表达载体pBAD gIII C中 ,经L arabinose(左旋阿拉伯糖 )诱导表达并初步鉴定。结果 构建出 70 0bp左右的单链基因 ,并获得阳性重组表达载体克隆 ,表达产物为相对分子质量 2 70 0 0左右的蛋白分子。结论 经因特网查询表明 ,单链抗体基因重链部分属于小鼠H链可变区ⅠA亚组 ;轻链属于小鼠κ轻链可变区Ⅱ亚组 ,此单链抗体基因的表达产物具有一定的特异结合活性。本研究为抗CD71单链抗体的临床应用打下了基础。 相似文献
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目的 获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序。方法 采用RT-PCR技术,从WuT4、WUT3、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因,进行克隆并作核苷酸序列分析。结果 以上几种抗体的轻重链可变区的 PCR产物大小均为 400bp左右,成功构建了pMD18-T-VL和 pMD18-T-VH克隆载体,经限制性酶切分析,其大小与预期结果相符,并按ABI PRLSM BigDye系统测序。结论 经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较,所获基因片段均为抗体基因。 相似文献
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本文比较了反向间接酶联免疫吸附法和传统的间接酶联免疫吸附法。发现前者更适合作为抗酶单克隆抗体制备中的筛选方法。并对试验中的各种反应条件,包括羊抗鼠IgG包板、待检单抗和酶反应的最适浓度及底物缓冲液的选择进行了探索,最后用该法筛选5次融合后培养的杂交瘤上清,对其结果进行了分析和评价。 相似文献
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遵照中央防总办公室负责同志的“搞清岳城水库特大洪水的预见期”的指示,最近我们就岳城水库1963、1956年的大水资料,进行了作业预报演习,从资料收集到产汇流计算直至水库调洪演算,取得了预想的结果。但从该两年型净雨放大的稀遇洪水的调洪成果发现,现行的控制运用方案在实际执 相似文献
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应用免疫组化酶染色法及免疫细胞荧光染色法体外检测了 WuT_3(抗 CD_3),WuT_4(抗CD_4),WuT_8(抗 CD_8),WuT_9(抗 CD_71 或 TfR),WuTac(抗 CD_(25)或 IL-2R)等5种临床治疗用小鼠抗人 T 淋巴细胞分化抗原单克隆抗体(简称单抗)与25种正常人体组织的反应性。结果显示,WuT_3与髓质胸腺细胞,淋巴结及扁桃体中 T 细胞区细胞,脾白髓中动脉周围淋巴鞘细胞及胃肠道粘膜层淋巴细胞呈阳性反应。WuT_4与皮质胸细胞及大多数髓质胸腺细胞呈阳性反应。WuT_8与皮质胸腺细胞及少数髓质胸腺细胞呈阳性反应。WuT_4 和 WuT_8阳性细胞在淋巴结、扁桃体、脾脏及胃肠道粘膜中的分布与 WuT_3 阳性细胞基本一致,但数量依次减少。淋巴结和扁桃体的生发中心以及脾脏的脾小结中散在分布有少数WuT_3,WuT4及 WuT_8阳性细胞。此外,睾丸中散在分布个别 WuT_8阳性淋巴细胞。WuT_9与26%的骨髓细胞及个别皮质胸腺细胞呈阳性反应。WuT_9 尚与小肠粘膜肠腺底部细胞呈较强染色。WuTac 仅与个别散在的髓质胸腺细胞呈阳性反应。上述5种单抗与其它非淋巴组织及细胞基本呈阴性反应。 相似文献
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