重组酿酒酵母生物合成菜油甾醇

菜油甾醇作为甾体药物（孕酮、雄烯二酮、氢化可的松等）的重要合成前体已受到国内外研究学者的广泛关注。首先通过生物信息学分析,筛选了10种不同来源的7-脱氢胆固醇还原酶DHCR7,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）内源的ERG5基因替换成不同来源的DHCR7基因,构建了菜油甾醇合成菌株。结果发现整合来源于Pangasianodon hypophthalmus DHCR7的菌株Zw507表现出最高的菜油甾醇的产量216.93 mg/L。进一步筛选了10种酵母内源启动强度较强的启动子来与PhDHCR7基因进行组合,结果显示以TEF1p为启动子时菜油甾醇的产量最高可达253.35 mg/L。为了进一步提高菜油甾醇产量,增加了DHCR7表达盒在酵母基因组上的拷贝数。当拷贝数为3个时,菜油甾醇的产量达到最高302.27 mg/L。最终,通过5 L发酵罐进行补料分批发酵,实现了916.88 mg/L菜油甾醇产量。该菌株可作为后续甾体药物生物合成的优良底盘细胞。     

重组大肠杆菌表达17β-羟基类固醇脱氢酶全细胞催化合成宝丹酮的研究

宝丹酮作为一种重要的蛋白同化雄性激素类固醇,具有提升肌肉质量和耐力的功能。宝丹酮的传统合成方法是以1,4-雄烯二酮(ADD)为底物通过化学法合成,但过程复杂、污染严重。17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)可催化甾体化合物C-17位点的氧化还原反应,实现ADD和宝丹酮的相互转化。本研究通过基因序列同源性分析,筛选到6种不同来源的17β-HSD基因并对其在大肠杆菌中进行异源表达。利用不同重组菌转化ADD合成宝丹酮,结果表明重组菌BL21/pET28a-HSDPy的ADD转化率最高,因此选择BL21/pET28a-HSDPy进行进一步研究。鉴定了重组菌的酶学性质并优化其全细胞转化条件。结果表明在生物量为36 g·L^-1、底物浓度为5.40 g·L^-1条件下,经过两次补料,获得了3.66g·L^-1宝丹酮,比优化前提高了4.1倍。而且在生物转化过程中未检测到副产物。为生物合成宝丹酮提供了可能。     

基于DE150的高速大电流窄脉宽半导体激光电源

总结了一种基于射频MOSFET管的高速大电流窄脉宽半导体激光驱动源设计方法,运用PSpice对整个驱动电路进行了仿真,最后利用DE150-201N09A MOSFET管制作了面积为12cm2的电路板,测试结果表明半导体激光器输出电流脉宽10ns左右、上升时间4ns,最大脉冲电流27A,最高重复频率可达50 kHz。     

水牛家水电站工程特点

水牛家水电站大坝为碎石土心墙堆石坝,坝高108 m,电站位于由北侧的文县弧形构造带,西侧的岷江断裂、雪山断裂、虎牙断裂和南东侧的北东向龙门山断裂带所围限的楔形地块西部,工程区地震烈度高、地质构造背景十分复杂。大坝位于海拔2 100 m以上,气候寒冷,日温差大。工程区特殊的地质、气候与自然地形条件使工程设计、施工与管理具有独特的特点。在工程建设过程中,大力推广和应用新技术、新工艺、新材料,通过科技创新,保证了工程质量、进度和安全。     

水牛家电站碎石土心墙堆石坝工程施工技术与管理

水牛家电站大坝为108 m高的碎石土心墙堆石坝,在施工过程中面临诸多技术难题。通过利用在建项目与专业院校、研究院所横向科研合作,开展了大量有效的技术创新研究工作,推广运用新材料、新技术并制定了科学严谨的质量管理程序,确定了合理、科学的施工工艺,大坝完建一年多时间,经受了＂5.12＂地震灾害考验,大坝填筑单项施工工期较合同提前9.5个月,创造了一年优质高效完成一座百米高土石坝的行业新记录。至2010年2月最新的监测成果资料表明：大坝运行良好,各项指标满足工程正常运行要求。     

基于时幅转换插入法的脉冲激光测距

针对传统脉冲激光测距直接计数法精度低的问题,本文介绍用时幅转换插入法来提高脉冲激光测距时间测量分辨率和测距精度的原理和技术途径.提出了时幅转换电路设计中的几个关键问题.在脉冲激光测距实验平中对设计的时幅转换电路进行了性能测试实验.结果表明,时幅转换插入法将时间测量分辨率由10 ns 提高到20ps ,测距精度由1.5 m 提高到5 cm .最后分析了影响脉冲激光测距精度的误差因素.