抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)在CHO细胞表达

［摘 要］目的 开展基因重组AT-Ⅲ的研究，试将人AT-Ⅲ cDNA在CHO细胞中进行表达。方法 将携带AT-Ⅲ基因的表达载体转染CHO细胞，用 G418筛选抗性克隆，SDS－PACE与Western Blot检测其表达产物；并采用生化法测定AT-Ⅲ的表达量，采用凝血酶空斑法测定表达产物的活性。结果 Western Blot分析发现转移至膜上的表达产物能与抗AT-Ⅲ单克隆抗体结合，分子量与人血浆中AT-Ⅲ一致，证明在CHO细胞中成功地表达了AT-Ⅲ，并具有天然AT-Ⅲ的生物活性。结论 获得了表达AT-Ⅲ CHO细胞株。     

IgG的β-折叠构象变化对其生物学活性的影响

采用圆二色谱和Westernblot等方法观察了热处理后冻于兔疫球蛋白G（IgG）的结构及生物学活性变化。经80℃72h和100℃2h干热处理后,IgG的β－折叠发生变构,活性抗原量减少,抗原决定簇有改变,抗体难以识别抗原,说明IgG的β－折叠构象改变对其生物学活性有明显的影响。