微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法检测α_1-蛋白酶抑制剂活性

目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2～14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。     

人血浆中纤维蛋白溶酶原纯化工艺样品蛋白含量改良BCA检测方法的建立及验证

目的 建立检测人血浆中纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)改良PIerceTM BCA蛋白试剂盒方法(简称改良BCA法),并进行验证及初步应用.方法 结合PierceTM BCA试剂盒的试管法与微孔板法检测人血浆中Pg;比较标准曲线拟合方式确定改良试剂盒的线性范围;通过牛血清白蛋白(bovine serum ...     

发色底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原纯化工艺的可行性分析

目的分析发光底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)纯化工艺的可行性。方法采用纤溶酶原测定试剂盒对ACL7000血凝仪运行发色底物法的性能进行确认;并对该方法的线性范围、准确度、精密度、选择性进行验证;应用Softmax及Statistic软件分析定标血浆及Pg纯化样品检测结果的平行性;采用验证的方法检测Pg全层析工艺样品的效价及目标样品存贮稳定性。结果 ACL7000血凝仪运行发色底物法的性能稳定。定标血浆标准曲线线性范围为0. 128～1. 28 U/mL,稀释样品回收率在92%～103%之间,R~2≥0. 99;定标血浆的高、中、低值、检测下限及正常质控血浆(control plasma normal,CPN)效价回收率批内及批间分别在91%～108%和94%～107%之间,批内及批间CV分别在0. 5%～1. 9%和0. 3%～1. 4%之间;Pg纯化各段层析缓冲液所含特殊组分除1%Tween80+0. 3%磷酸三丁酯外对Pg效价检测无影响。纯化样品Pg效价检测曲线与定标血浆曲线平行。全层析工艺Pg半成品的比活性达8 U/mg以上,效价总回收率达50%以上;Pg亲和层析洗脱液在-30℃保存42 d、18～25℃及2～8℃保存7 d效价稳定,Pg半成品在-30℃保存68 d、18～25℃及2～8℃保存38 h效价稳定。结论纤溶酶原测定试剂盒(发色底物法)具有较好的线性范围、准确度、精密度和选择性,ACL7000血凝仪运行该方法可用于Pg全层析工艺样品的效价检测,本实验为Pg纯化工艺研究奠定了基础。     

基于变分模态分解与集成深度模型的锂电池剩余寿命预测方法

锂电池剩余寿命(RUL)预测对于锂电池安全使用至关重要.由于锂电池使用过程中存在容量再生现象和随机干扰等因素,导致单一尺度信号下单一模型的预测精度及泛化性能较差.针对上述问题,提出一种新的基于变分模态分解(VMD)与集成深度模型的锂电池剩余寿命预测方法.首先,采用变分模态分解将锂电池容量数据进行多尺度分解,得到信号的全...     

基于EMD多尺度威布尔分布与HMM的轴承性能退化评估方法

轴承作为旋转机械中的重要部件,对其性能退化状态进行准确评估是开展预测性维护的重要前提.针对现有性能退化指标在鲁棒性和敏感性上的不足,提出一种基于多尺度威布尔分布与隐马尔可夫模型(Hidden Markov model,HMM)的滚动轴承性能退化评估方法.首先,采用经验模态分解(empirical mode decomp...