山东道地药材全蝎HPLC指纹图谱研究

目的:建立山东道地药材全蝎HPLC指纹图谱,为其质量控制标准的制定提供依据。方法:色谱柱采用美国安捷伦科技公司ZORBAX SB-C18柱,粒度为5μm,4.6×250mm×4.6mm;流动相为乙腈-0.1%磷酸水(非线性梯度洗脱);检测波长210 nm;进样量20μL;柱温:25℃;流速1.0 mL·min-1。结果:建立了山东不同产地10批全蝎的对照指纹图谱,确立19个共有峰,其中以16号色谱峰为内标参照峰,各批次样品的指纹图谱的相似度均大于0.8。结论:该实验方法操作简便,结果准确、可靠、重复性好,可为山东道地药材全蝎的质量控制标准的制定提供有效的依据。     

高效毛细管电泳指纹图谱法检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10kDa)的实验研究

建立了用高效毛细管电泳指纹图谱法来检测全蝎酶解液中蛋白类成分(10k Da)的分析方法。采用未涂层弹性熔融石英毛细管柱(93 cm×0.75μm),有效柱长为79 cm;二极管阵列检测器;50 mbar压力进样10s;运行电压为-30 kV;柱温为20℃;运行时间为60 min;考察不同检测波长、缓冲溶液种类、pH、浓度等对色谱峰的影响,并对10批样品做了相似度评价。在缓冲溶液浓度为0.2 mol·L~(-1)、pH=5.0硼酸缓冲溶液时响应值较高,谱图效果最好;检测波长为220 nm时出峰较多、吸收好,初步建立了以25个峰为共有峰的指纹图谱。结论:25个峰的高效毛细管电泳指纹图谱共有模式可以作为全蝎酶解液中蛋白类成分(10 kDa)的鉴别方法。     

全蝎酶解液超滤物对三种细胞抗肿瘤活性比较研究

目的:比较全蝎酶解液10kDa分子量段超滤物对喉癌Hep-2、肺腺癌A549、乳腺癌MCF-7三种细胞的抗肿瘤抑制作用。方法:根据张盼盼~([1])等人方法进行酶解,经过10kDa超滤膜滤过,采用MTT法探究不同浓度超滤物对三种癌细胞的抑制作用。结果:药物对喉癌Hep-2的抑制作用比对肺腺癌A549的抑制作用强,在实验设置浓度内药物对乳腺癌MCF-7的抑制作用先增强后降低。     

枸杞离体快速繁殖技术研究及蛋白质含量测定

目的:选用宁夏枸杞不同部位为外植体,探究不同外植体、不同灭菌时间、激素配比不同对于宁夏枸杞组织培养的影响,测定其蛋白质含量并与野生种对比。方法:以枸杞的嫩叶、嫩茎为外植体,探讨培养基类型、植物激素类型、激素浓度、消毒时间、接种方式、等对培养结果的影响,为优化枸杞快速繁殖体系提供依据,并通过测定紫外分光光度计对野生枸杞和栽培枸杞蛋白质含量进行对比和分析。结果:最佳消毒试剂及时间:75%酒精30 s+0.1%升汞8 min;以MS培养基为基本培养基,诱导丛生芽分化的最佳培养基:NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,诱导率为86.67%,死亡率为13.33%;诱导芽增殖的最佳培养基:NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,诱导率为76.67%,死亡率为23.33%;最佳生根培养基:NAA0.6mg/L+6-BA1.5mg/L,大量生根且根系浓密,栽培枸杞比野生枸杞的蛋白质含量明显增多。     

全蝎白术白头翁组合发酵品不同醇浓度提取物的活性成分分析及体外药理研究

评价全蝎白术白头翁组合发酵品(SAPZFP)不同醇浓度提取物的活性成分含量及体外抗肿瘤活性差异。分别测定SAPZFP不同醇浓度提取物的醇溶性总蛋白、总多糖、总黄酮的含量,并采用MTT法检测不同醇浓度提取物抑制肿瘤细胞体外增殖的能力。SAPZFP不同醇浓度提取物均具有体外抗肿瘤活性,其中75%醇提物抑制乳腺癌细胞株MCF-7、肺腺癌细胞株A549体外增殖的能力最强,IC50分别为0.066、0.022 mg·mL-1。综上所述,SAPZFP的25%、50%、75%醇提物均具有体外抗肿瘤活性,且75%醇提物效果最优。