柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量

目的测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量。方法采用反相高效液相色谱法,以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,在色谱柱内层析,以紫外检测器在360nm波长处检测,用外标法计算含量。结果当盐酸精氨酸和甘氨酸衍生化的取样范围为0.25～2.00mg/ml时,线性相关系数分别为0.99998和0.99999。盐酸精氨酸和甘氨酸的平均加标回收率分别为96.6%和95.4%。结论此方法检测结果准确,可用于冻干人纤维蛋白原中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量检测。     

冻干人凝血酶中三羟甲基氨基甲烷含量离子色谱-脉冲安培测定法的建立及验证

目的建立检测冻干人凝血酶(Thrombin,TB)中三羟甲基氨基甲烷(Tris)含量的离子色谱-脉冲安培法,并进行方法验证。方法以戴安Ionpac CS16为阳离子交换色谱柱,40 mmol/L甲基磺酸(Methylsulfonic acid,MAS)溶液为淋洗液,流速为1.0 m L/min;采用500 mmol/L氢氧化钠溶液进行柱后衍生,流速:0.3 m L/min;柱温:30℃;进样体积:25μL;经脉冲安培检测器进行检测。同时对该方法进行专属性、精密度、准确性验证,并确定方法的线性范围、检测限和定量限。结果该方法可特异性检测Tris含量,供试品中甘氨酸、枸橼酸离子、钠离子等物质对Tris的测定无干扰;精密度RSD为0.18%;加标样品的平均回收率为98.1%,RSD≤5%;Tris对照品在0.01~0.08 mmol/L的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=1 755.3 X+1.838,R2=0.999 8;检测限和定量限分别为0.004和0.012 mg/L。结论成功建立了冻干TB中Tris含量的离子色谱-脉冲安培检测法,且方法具有良好的特异性、精密度及准确性。     

高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量

目的应用高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量。方法参照《中国药典》三部(2005版)附录ⅢD,采用凝胶色谱柱,以紫外吸收检测器在280nm波长处检测,按照《中国药典》三部(2005版)附录ⅢB中的公式计算人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量。分析线性关系,计算加标回收率,并验证该方法的重复性。结果乙酰色氨酸含量在0.16～0.64mmol/L的范围内与峰面积有良好的线性关系,相关系数为0.99992;3个浓度梯度(0.16、0.32和0.48mmol/L)乙酰色氨酸的加标回收率分别为100.4%、103.9%和102.8%;连续5次检测人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量,变异系数为0.46%。结论应用高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量,结果准确可靠。