人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白的原核表达及纯化

目的表达并纯化人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白。方法用RT-PCR法从人甲型流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)中扩增NS1基因,克隆入原核表达载体pTXB1,构建重组原核表达质粒pTXB1/NS1,经酶切鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达形式和表达量。经几丁质柱亲和层析纯化表达蛋白,串联飞行时间质谱仪检测其相对分子质量。结果所构建的重组表达质粒pTXB1/NS1序列完整,插入的基因片段全长690bp。以1.0mmol/LIPTG37℃诱导4h,重组蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的50%以上。破菌上清及沉淀中均有目的蛋白表达。纯化的NS1蛋白纯度达95%以上,相对分子质量约为26000。结论已成功表达并纯化了人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白,为其进一步的研究奠定了基础。     

在役钢丝绳安全检测方法及评估研究

分析在役钢丝绳目视检测法和电磁检测法的优缺点,充分利用目视检测及电磁检测的优点,并根据钢丝绳不同缺陷形式制定安全检测方案。介绍目视检测、电磁检测结果以及钢丝绳的使用环境及损伤机制,并参考前一根钢丝绳的使用情况,合理评估钢丝绳状态及使用时间。电磁检测与目视检测相结合的钢丝绳检测方案,能够预防钢丝绳安全事故的发生,延长钢丝绳的使用寿命,降低检测工人的劳动强度,并降低使用成本。     

钢丝绳旋转性能测定及研究

钢丝绳承受载荷时,绝大多数结构的钢丝绳会绕其自身轴线旋转,旋转是钢丝绳难以克服的特性。介绍ISO 21669:2005给出的吊钩提升重物测定装置存在的缺点。设计了利用材料试验机测定钢丝绳旋转性能的新型测定装置,并选取典型结构的钢丝绳进行长度为直径100和150倍的旋转度试验,经过换算,得出长度为直径1 000倍的钢丝绳旋转的圈数偏差在0~1.7圈,证实了钢丝绳的旋转特性和抗旋转钢丝绳的优越性。新型测定装置优点:加载方便、安全;旋转角度测量精度高,可测定钢丝绳扭矩;测试范围广。     

影响钢丝绳弯曲疲劳试验因素的分析

对弯曲疲劳机的选择、弯曲滑轮、试样弯曲频率、包角、张力等影响钢丝绳弯曲疲劳试验结论的重要因素进行分析,根据质检中心日常试验过程中对钢丝绳弯曲疲劳试验方式的总结,建议用户进行钢丝绳弯曲疲劳试验时应模拟钢丝绳使用现场的情况。     

兰州煤气厂开发下游产品的设想

通过对天然气价格及其下游产品的成本分析 ,结合兰州煤气厂具体情况 ,论述了利用现有煤化工装置生产的煤气联产甲醇 ,并以甲醇为基本原料发展煤化工产品的技术和经济可行性。     

人乳头瘤病毒16型L1蛋白VLP的原核表达及纯化

目的在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白病毒样颗粒(VLP),并进行纯化,为研制宫颈癌疫苗提供新的思路。方法以HPV16基因组DNA为模板,PCR扩增HPV16L1基因的编码区,定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)编码区下游,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用GST纯化柱纯化重组融合蛋白,并用凝血酶切去GST标签,再经S100分子筛纯化,浓缩后,电镜观察纯化蛋白的VLP形态。结果重组表达质粒经双酶切和测序,证明构建正确。表达产物的相对分子质量约为80000,主要以可溶性形式存在。Western blot显示,目的蛋白可与小鼠抗HPV16L1抗体发生特异性反应。纯化蛋白的纯度约为95%,在电镜下可见直径约为50～60nm的VLP。结论已成功地在大肠杆菌中表达了可溶性的HPV16L1蛋白VLP,并进行了纯化,为宫颈癌疫苗及血清学诊断试剂的研制奠定了基础。     

预应力混凝土用钢绞线弹性模量不确定度来源分析及评定

为满足预应力混凝土用钢绞线在重要工程建设中的使用要求,《预应力混凝土用钢绞线》对钢绞线的弹性模量规定(195±10) GPa,预应力混凝土用钢绞线施工时,要求实际伸长值与理论伸长值误差不超过6%。准确测定弹性模量及不确定度评定对钢绞线产品质量把控和钢绞线伸长量计算具有重要意义。采用拉伸试验测定钢绞线弹性模量,对钢绞线弹性模量不确定度来源进行分析,通过对钢绞线弹性模量的测量及对误差等进行计算,得出在k_p=2及95%的置信水平下,弹性模量的试验结果准确表示为(199±10) GPa,对弹性模量不确定度进行评定可为把控评价钢绞线弹性模量质量和预应力施工伸长量计算提供参考。     

钢丝绳安全评价方法研究

钢丝绳作为易耗品广泛应用于各种装置中,钢丝绳的安全对装置的安全有着重要作用。针对判定钢丝绳安全的认识不足,仅把断丝作为评价方法存在不全面的问题。通过系统识别钢丝绳局部损伤缺陷,并对钢丝绳局部损伤缺陷先进行单项评价,再进行综合评价,由此判断钢丝绳是否安全的综合评价方法,不仅能够准确地对钢丝绳局部损伤缺陷进行评价,同时还能够准确全面评价钢丝绳是否处于安全状态。     

一种好的塔机起升机构

目前，我国大多数塔机生产厂使用的起升机构都是Π型机构，传动示意图如图１。１、电动机２、减速器３、卷筒图１Π型机构示意图Π型机构大家都很熟悉，传动结构也很简单。如图１所示，Π型机构的减速器，是两对圆柱齿轮传动。机构中各部分传动的联接均采用平键。电动机采用YZTDE—４／８／３２极，转速为１４００／７００／１４０（r／min）电机带制动器。随着技术的进步，一个更好的L型起升机构出现了，其传动示意如图２。减速器２是行星———弧齿锥齿轮两级传动。传动的联接全部采用渐开线花键。电动机采用YZTDE—２／４／２０级，…