柱前手性衍生化-RP-HPLC法拆分D,L-草铵膦

[目的]建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分D,L-草铵膦。[方法]以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用戴安C18色谱柱,流速1.0 mL/min,50 mmol/L醋酸铵缓冲溶液(pH值5.7)-甲醇(体积比90∶10)流动相,柱温35℃,激发波长350 nm,发射波长450 nm。[结果]L-草铵膦与其光学异构体分离度大于4,最低检测质量浓度为0.1μg/L(S/N≥3),线性范围为1~100 mg/L(r2为0.9995),方法重复性好。[结论]采用邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)经柱前手性衍生化-RP-HPLC法可用于L-草铵膦的光学纯度控制。     

混凝土微生物自修复材料的研究进展

混凝土裂缝会影响建筑美观并破坏其结构安全性,一种新型混凝土微生物自修复材料可利用生物矿化菌特有的矿化代谢机制智能化修复混凝土裂缝,实现混凝土材料的自感知与自愈合,弥补传统混凝土的裂缝修复效果差、修复成本高、修复环保压力大等缺点.针对这一环境友好型材料,运用CiteSpace和知识图谱技术对国内外近十年来研究进展进行文献...     

─株能转化β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的菌株G20的分离与鉴定

从浙江杭州地区的土壤分离、筛选到1株能转化β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的菌株G20.对该菌进行形态特征观察、生理生化测定、Biolog GP2鉴定以及16S rDNA序列相似性和系统发育分析,确定G20为红串红球菌(Rhodococcus erythropolis).其特征:培养48h后菌落呈桔黄色,干燥,隆起,圆形;电镜观察,为长杆菌,大小(0.3～0.8)μm×(2～5)μm;革兰氏阳性菌;能较强利用Biolog系统95种碳源中的25种,与红串红球菌的相似性100%,相似性指数为0.58;以16S rDNA序列为基础构建包括15株邻近种属细菌在内的系统发育树,其中与红串红球菌的相似性最高.     

实践教学对生物工程设备课程教学质量的提高

实践教学环节是对课程教学的一个重要补充,是将课堂所学的基础理论知识及专业技术知识与实际运用相结合的实践过程。本文探讨了生物工程设备课程教学中如何将理论教学与实践教学相结合,在实习教学内容和教学方法改革、实习基地建设等方面提出了相关措施,以期提高课程教学质量,促进学生的工程能力和创新能力的培养。     

离子注入选育高产衣康酸菌株及其发酵条件优化研究

采用低聚氮离子束注入衣康酸生产菌株土曲霉ZJB－04173,获得一株衣康酸产量提高的突变株HA90,该菌株在出发培养基37cC℃。PLackett-Burman实验结果表明葡萄糖,硝酸铵和硫酸镁对菌种产酸有显著的影响。然后利用Box—Behnken设计及响应面分析确定这三个主要因素最佳浓度。在优化后的培养基中进行发酵,产酸量最高达到84g／L,比出发菌株提高了50％。     

甲酸脱氢酶外源表达发酵条件优化及在L-2-氨基丁酸合成中的应用

采用摇瓶对重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/p ET28b-FDH外源表达甲酸脱氢酶发酵条件进行优化。结果表明,当诱导温度22℃,诱导剂IPTG浓度0.1 mmol/L,诱导时间16 h条件下,可溶性目的蛋白表达量为52.12 mg/g,相对于优化前的40.12 mg/g,提高了29.91%。在此基础上,在5 L发酵罐上对外源表达甲酸脱氢酶发酵条件进行优化。结果表明,当诱导温度22℃,诱导剂乳糖质量浓度8 g/L,诱导时间16 h条件下可溶性目的蛋白表达量为41.26 mg/g,相对于优化前的34.15 mg/g提高了20.82%。利用该条件下培养的菌体经破碎后获得甲酸脱氢酶粗酶液与适当比例的苏氨酸脱氨酶及亮氨酸脱氢酶粗酶液进行匹配,在底物L-苏氨酸质量浓度为180 g/L,辅底物甲酸铵120 g/L,NAD~+0.1 g/L,在1 L反应体系中,恒温水浴35℃,搅拌转速500 r/mim条件下,反应9 h后,底物转化率达99%以上,时空产率17.2 g/(L·h),e.e.值99.5%以上。