胎衣不下奶牛母体胎盘中有丝分裂原活化蛋白激酶及细胞外信号调节蛋白激酶基因异常表达的分析

目的分析胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)奶牛母体胎盘组织中有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK,MEK)及细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK,p42/44 MAPK)的异常表达。方法选取年龄、胎次、体况相近的产后胎衣正常排出和RFM奶牛各3头,分别为N和R组。产后用子宫内膜采样器采集两组奶牛胎盘样本,Western blot法检测样本中MEK、p42/44 MAPK、P-p42/44MAPK蛋白表达水平,RT-qPCR法检测样本中MEK、p42/44 MAPK基因mRNA转录水平。结果与N组比较,R组奶牛胎盘组织中MEK蛋白表达水平显著下调(P 0. 01),p42/44 MAPK蛋白表达水平下调,但差异无统计学意义(P 0. 05),P-p42/44 MAPK蛋白表达水平显著上调(P 0. 001);R组奶牛胎盘组织中MEK及p42/44 MAPK基因mRNA转录水平均显著下调(P 0. 01)。结论 RFM奶牛母体胎盘组织中MEK与p42/44 MAPK蛋白及m RNA转录水平均明显下调,可能是奶牛RFM发生机制中的关键。     

胎衣不下奶牛母体胎盘中血管内皮生长因子A异常表达的分析

目的分析胎衣不下(retained fetal membrane,RFM)奶牛母体胎盘组织中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGFA)的表达情况。方法提取RFM及胎衣正常排出奶牛母体胎盘组织中的总蛋白,采用荧光定量PCR及Western blot法检测两组奶牛母体胎盘组织中VEGFA的mRNA转录及蛋白表达水平。结果与胎衣正常排出组相比,RFM组奶牛母体胎盘组织中VEGFA的mRNA转录及蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(P 0. 01)。结论发生RFM的奶牛母体胎盘组织中VEGFA表达减少,提示VEGFA可能参与该病的发生发展。     

胎衣不下奶牛母体胎盘黏着斑激酶异常表达分析及验证

目的通过对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)奶牛胎盘组织中差异表达的检测及验证,分析FAK在RFM中的作用。方法选取无其他疾病影响的胎衣自然排出组和RFM组奶牛,提取两组奶牛胎盘组织中的总蛋白和总RNA,利用Western blot及荧光定量PCR法对其FAK蛋白及mRNA水平进行检测。结果与胎衣自然排出组相比,RFM组奶牛母体胎盘组织中FAK蛋白及mRNA水平明显降低(P0.05)。结论发生RFM的奶牛母体胎盘中FAK表达下调,提示FAK可能参与该疾病的发生与发展。