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目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2~14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。 相似文献
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李策生 谢勇 杨汇川 余鼎 侯继锋 袁明超 周东波 杜涛 吴晓 王丹 胡勇 喻剑虹 邓琨 王月 龚钦 周志军 彭焱 林连珍 韩韧 邢延涛 梁小龙 毛敏 梅宇 李陶敬 张勇 梁洪 董德梅 何彦林 付道兴 杨晓明 《中国生物制品学杂志》2021,(6):699-703,708
目的 探讨血液单采浆技术在新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)康复者恢复期血浆采集工作中的应用及安全性,并分析COVID-19康复者恢复期血浆的质量特征.方法 捐献者知情后,登记捐献血浆者性别、年龄、出院或解除医学隔离日期等基本情况,体检后使用血液分离机单采浆技术采集C... 相似文献
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