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目的在毕赤酵母中表达小鼠B淋巴细胞活化刺激因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)可溶性片段(msBAFF),纯化后检测其生物学活性。方法采用RT-PCR法从BALB/c小鼠外周血单核细胞中扩增msBAFF基因,插入表达载体pPICZαA中,构建重组表达质粒pPICZαA-msBAFF,转化巴斯德毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。表达的重组msBAFF蛋白经硫酸铵沉淀及Q Sepharose XL阴离子交换柱纯化后,分别单独及与anti-IgM共同作用于BALB/c小鼠脾脏B淋巴细胞,检测其对B淋巴细胞活力的影响。结果重组表达质粒pPICZαA-msBAFF经双酶切鉴定构建正确;表达的重组msBAFF蛋白相对分子质量约为20 000,诱导60 h表达量较高;经硫酸铵沉淀、透析除盐及Q Sepharose XL阴离子交换柱纯化,获得了较纯的msBAFF,BCA法测定纯化蛋白的产率为20 mg/L;重组BAFF蛋白具有促进小鼠B淋巴细胞活力的作用。结论成功在毕赤酵母中表达了重组msBAFF蛋白,纯化的重组蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究小鼠BAFF基因的功能及基于BAFF的佐剂与单克隆抗体的制备奠定了物质基础。 相似文献
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高清晰DivX电影制作字幕篇 总被引:1,自引:0,他引:1
DirectVOBSUB是一个非常优秀的DivX(MPEG-4)宇幕制作和协助播放软件。完全兼容各种语言,制作和使用都很简单。 软件安装之后,点击“开始→程序→VobSub→VobSub Configure”,出现“Filter:VobSub”窗口,点击“Open…”按钮,选择包含OVD影片主文件信息的,ifo文件(?)。之后选择一个存放宇幕文件的文件夹,接着进入宇幕流选择画面。这时候我们看到四个方框,右上方是选择宇幕语言,一般 相似文献
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