木瓜蛋白酶对菠菜叶蛋白的改性研究

利用木瓜蛋白酶对菠菜叶蛋白进行酶法改性,通过均匀试验得出,酶解菠菜叶蛋白的最佳条件为温度55℃,pH6.5,E/S为0.5%,时间为2 h,菠菜叶蛋白的水解度可达15.85%;通过比较在不同pH下酶解前后菠菜叶蛋白的部分功能性质,结果表明,酶解后菠菜叶蛋白的等电点由原来的4.0漂移至3.4,且其溶解性、起泡性、稳定性及其乳化性较改性前均有不同程度的提高。     

反胶团酶反应过程开发研究进展

反胶团酶反应具有水相与有机相酶反应的共同优点 ,因而受到人们的重视。制约其实际应用的重要原因在于如何解决酶的重复利用问题。最初人们采用水溶液萃取法回收酶 ,但由于条件苛刻 ,酶活回收率较低。相变法利用温度的改变使体系分相以实现酶的回收 ,操作简便 ,但仍有较大的酶活损失。连续流两相离心反应器可以实现反胶团酶反应的连续操作且酶的损失很小 ,但该反应器传质速率较低因而转化率不高。膜反应器是反胶团酶反应中研究最多也最有应用前途的一种反应器形式。文中介绍了反胶团酶反应中酶重复利用的方法 ,对其过程开发的最新进展进行了综述。     

长双歧杆菌亚种JCM 1217基因组分泌蛋白的分析

目的:双岐杆菌是人体肠道重要的益生菌,对其分泌蛋白的分析有助于正确理解该菌株的各项生理功能及与宿主相互作用的分子机制。方法:从GenBank中获得长双歧杆菌亚种JCM 1217基因组注释的蛋白质氨基酸序列,然后用SignalP v3.0、TMHMM 2.0、TatP、LipoP1.0、GPI、DOLOP软件分析该基因组中的分泌蛋白功能及其与信号肽的类型、特点等。结果:从长双岐杆菌亚种JCM1217中共筛出58个Sec途径分泌蛋白,1个Tat途径分泌蛋白,142个非经典分泌蛋白质。该菌株中Sec途径分泌蛋白主要包括被I型(Spase I)信号肽酶和II型信号肽酶(SpaseII)识别的蛋白,其信号肽长度最多的分别有25个和28个氨基酸。SpaseII分泌蛋白长度分布范围及蛋白平均长度都比SpaseI型分泌蛋白要小。双岐杆菌信号肽与成熟蛋白切割位点左侧的-3位、-2位和-1位丙氨酸分别占到61.11%、19.4%和83.33%,属于典型的A-X-A的信号肽识别位点结构。对其功能的分析表明,该菌株的分泌蛋白除了一大部分为假定蛋白外,Spase I型分泌蛋白主要包括一些代谢酶类,水解酶比较少;SpaseII型分泌蛋白则主要是ABC转运相关蛋白质;非经典分泌蛋白种类多,包括代谢细胞壁合成在内的许多相关酶类,基因表达DNA复制相关蛋白质及其它功能蛋白。结论:双岐杆菌分泌蛋白及其信号肽特征类似其它革兰氏阳性菌,分泌蛋白功能与其宿主环境适应。     

乳酸菌对高糖高脂2型糖尿病小鼠血脂的影响

目的：研究两株乳酸菌对糖尿病小鼠血糖、血脂、血清炎症因子、肝脏抗氧化水平、胰腺病理变化和附睾脂肪组织白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）及脂联素（adiponectin,Adipoq）基因表达的影响。方法：通过降胆固醇、耐酸及耐胆盐等体外实验从6 株乳酸菌中筛选降脂较好的2 株乳酸菌。利用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）结合高糖高脂饲料的方法建立小鼠糖尿病模型。将100 只雄性BALB/c小鼠随机分为4 组,每组25 只,对照组（N）（正常饮食）、模型组（M）（高糖高脂饮食）、SY13菌组（SY13）（高糖高脂饮食外加SY13菌液灌胃）、36号菌组（D36）（高糖高脂饮食外加36号菌液灌胃）,分别在灌胃6、10 周和14 周时处死小鼠,动态检测小鼠血糖、血脂等相关生化指标水平,利用苏木精-伊红染色观察胰腺组织病理变化,通过逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测附睾脂肪组织中IL-10和Adipoq基因的mRNA表达情况。结果：筛选出干酪乳酸菌SY13和D36有较强的降胆固醇、耐酸和耐胆盐能力。与M组相比,通过一段时间菌液的灌胃,显著抑制了小鼠血糖水平和血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平的上升（P＜0.05）,提高了高密度脂蛋白胆固醇水平和抗炎因子IL-10水平（P＜0.05）,不同程度提高了肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力,显著降低了丙二醛含量（P＜0.05）,改善了小鼠糖代谢紊乱状况,明显减轻了胰岛和腺泡细胞病变情况,脂肪组织中IL-10和Adipoq基因表达水平显著提高。结论：乳酸菌SY13和D36能够显著改善糖高脂饮食联合STZ诱导的小鼠糖脂代谢。     

超声波辅助提取扁核木叶蛋白的工艺优化

在酸溶法的基础上采用超声波辅助提取扁核木叶蛋白,分别研究了时间、温度、液料比及溶液pH对扁核木叶蛋白提取率的影响,并在单因素试验的基础上进行了正交试验,结果表明,酸溶法提取扁核木叶蛋白的最佳条件:时间25 min、温度45℃、液料比8、pH3.6,此时,扁核木叶蛋白的提取率为70.37％;超声波辅助酸溶法提取扁核木叶蛋白的最佳条件:时间20 min、温度40℃、液料比12、pH 4.2,此时,扁核木叶蛋白的提取率可达87.90％,与传统的酸溶法相比,提取率提高了17.53％.     

绿豆芽中SOD的分离纯化、固定化及性质研究

为降低SOD生产成本,提高其稳定性及其重复利用率,选用绿豆芽为材料,对SOD进行分离纯化,固定化及性质研究。结果表明,用0.05 mol/L pH7.8磷酸缓冲液(含0.1 mol/L MEDTA)提取SOD,40%饱和度的硫酸铵去除杂蛋白、80%饱和度的硫酸铵沉淀SOD,DEAE-纤维素-柱层析纯化,SOD的纯度可达4.662×10-5 kat/mg蛋白,总酶活回收率达43.7%,纯化倍数达26.4;包埋剂聚丙烯酰胺凝胶的浓度为22.5%时,固定化酶的结合效率为87.0%,固定化酶的活力回收率为80.9%;H2O2和KCN对SOD的活力抑制表明,绿豆芽SOD为Cu、Zn-SOD。PAGE电泳图谱显示绿豆芽Cu、Zn-SOD由2个亚基组成。本研究结果将为绿豆芽SOD的开发利用提供理论参考。