柱前衍生化HPLC法测定CHO细胞培养上清中氨基酸浓度

以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰-亚氨基甲酸酯为柱前衍生化试剂,结合HPLC技术,首次建立了定量分析CHO细胞培养上清中氨基酸浓度的方法.选用Agilent 1260型高效液相色谱仪,AccQ-TagTM柱,以流动相A和流动相B[乙腈-水（60∶40,体积比）]进行梯度洗脱,荧光激发波长为250 nm,发射波长为395 nm,柱温为42.5℃,进样量为5uL.结果表明：21种氨基酸的线性回归系数均大于0.99,连续6次测定培养上清中氨基酸组分峰面积RSD均小于5％;21种氨基酸9次测定的平均加标回收率为96.8％,RSD为4.93％.该方法快速、简便、重复性好、结果准确,符合动物细胞培养上清中氨基酸分析的要求.