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用一株蜡状芽孢杆菌新菌株ZJB-07112 (Bacillus cereus ZJB-07112)发酵生产酰胺酶,经超声波细胞破碎、High Q阴离子色谱、Phenyl-Sepharose疏水色谱等步骤获得了凝胶电泳均一的酰胺酶。用12.5% SDS-PAGE测得该酶的分子量约为60.6 kD。其N端氨基酸序列为ATIRPDDKAI。该酶水解反应的最适pH和最适温度分别为7.5和35 ℃。在pH 7.5条件下,该酶在50 ℃以上容易失活,60 ℃保温30 min后,仅保留10.8%的酶活。除了Hg+ 、Ag+等重金属离子和尿素外,其他金属离子和EDTA对该酶的活性影响不大。以丙烯酰胺为底物时,该酶的Km和Vmax值分别为2.64 mmol·L-1和0.6 μmol·min-1·ml-1。 相似文献
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离子注入技术被广泛应用于微生物的品种改良.利用N 离子注入法对本实验室筛选并保藏的产2,2-二甲基环丙腈水合酶菌种Pseudomonas sp.ZJUT0509进行选育,以提高2,2-二甲基环丙甲酰胺的产量,为进一步的手性拆分提供更多的原料.结果表明,氮离子注入诱变Pseudomonas sp.ZJUT0509的存活率曲线符合离子注入诱变的"马鞍型"特征曲线.通过离子注入获得的突变株的腈水合酶活性有显著提高,其中突变株F60-4的酶活达30.1 U·mL-1,约为原始菌株的9倍.对突变株F60-4进行产酶条件的优化考察,获得了培养条件.F60-4菌株产酶的最佳碳源是葡萄糖(2 g·L-1),最佳氮源是酵母粉(10 g·L-1),最适初始pH值为6.5,最适发酵温度为20℃,最佳诱导剂为1.0g·L-1的己内酰胺.与原始菌株Pseudomonas sp.ZJUT0509相比,突变株F60-4对有机氮源的利用率更高.最佳诱导剂由己内酰胺代替了原来的2,2-二甲基环丙甲腈,使实验操作简便.突变株F60-4的发酵周期为36 h,比原始菌株缩短了12 h. 相似文献
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1979年,日本北里大学大村智等和美国Merck公司合作开发了一种16元大环内酯抗生物Avermectin,其对动物寄生虫及多种农业害虫有很高的杀虫作用。 相似文献
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[目的]建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分D,L-草铵膦。[方法]以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用戴安C18色谱柱,流速1.0 mL/min,50 mmol/L醋酸铵缓冲溶液(pH值5.7)-甲醇(体积比90∶10)流动相,柱温35℃,激发波长350 nm,发射波长450 nm。[结果]L-草铵膦与其光学异构体分离度大于4,最低检测质量浓度为0.1μg/L(S/N≥3),线性范围为1~100 mg/L(r2为0.9995),方法重复性好。[结论]采用邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)经柱前手性衍生化-RP-HPLC法可用于L-草铵膦的光学纯度控制。 相似文献
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生物工程技术的迅速发展,必然导致农药学科的深刻变化。以发酵工程为主的生物技术产品已在植保中广泛应用;酶工程,包括借助微生物的作用,已引入有机合成领域,用以改造农药及中间体的生产工艺;利用新菌种,可以有效地治理三废;细胞工程和遗传工程技术将为人工合成天然活性物质开辟新的途径。认为,近期工业研究开发的重点应是,充分利用天然的微生物资源,首先建立现代化的发酵工程,进一步利用一切生物工程手段,提高现有农药的生产水平,尽快取得经济效益。同时筛选新的生物活性物种,通过酶工程,在难于进行的化学反应和难以治理的三废中取得效果。逐步建立基因工程研究。 相似文献
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生物技术在化学工业中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
阐明了化工产业中应用生物技术的特点。对于生物技术在化学品生产中的应用及其研究开发现状进行了综述。 相似文献