应用蛋白质组学筛选能量负平衡卵巢静止奶牛生物标记物

目的运用蛋白质组学技术筛选能量负平衡卵巢静止奶牛的生物标记物,建立早期诊断标准,并探讨其发病机制。方法应用荧光差异双向凝胶电泳(fluorescence two-dimensional differential gel electrophoresis,2D-DIGE)和基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/lonization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS),鉴定能量正平衡发情奶牛和能量负平衡卵巢静止奶牛的差异蛋白质。采用生物信息学、蛋白印迹和受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析差异蛋白质,并确定用于早期诊断卵巢静止的生物标志物。结果两组奶牛筛选出12种差异表达蛋白,这些差异蛋白主要参与脂类代谢、维生素代谢、补体凝血级联及过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptor-α,PPAR)信号通路,其中α-1-微球蛋白/bikunin前体(alpha-1-microglobulin/bikunin precursor,AMBP)可作为卵巢静止早期诊断的标志物,预警值为4 346.75 ng/L。结论应用蛋白组学筛选出能量负平衡导致奶牛卵巢静止的12种差异表达蛋白,确定了用于早期诊断卵巢静止的生物标志物,为卵巢静止的临床诊断和发病机制奠定了基础。     

基于Actinomyces ruminicola的微生态制剂对瘤胃发酵的影响

目的探讨基于Actinomyces ruminicola的微生态制剂对瘤胃发酵的影响。方法将分离得到的能生成挥发性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA)的瘤胃厌氧菌Actinomyces ruminicola(命名为NY2,以下简写为Ar)与痤疮丙酸杆菌(以下简写为Pa)按3种比例混合制成微生态制剂(M1:Ar∶Pa=2∶3;M2:Ar∶Pa=1∶1;M3:Ar∶Pa=3∶2),进行羊体内发酵试验,分别于饲喂后0、2、4、6、8、10、12和24 h无菌采集各组羊的瘤胃液,用精密p H检测仪测定瘤胃液的酸碱度;Waters2695液相色谱仪测定瘤胃液中VFA(主要是乙酸、丙酸和丁酸)的含量。结果各组瘤胃液的p H值均呈先下降后升高的趋势;M2组瘤胃液的p H值与M1和M3组差异有统计学意义(P均0.05)。当微生态制剂中Ar∶Pa=1∶1,饲喂4~6 h后,瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸和总VFA的浓度均达最高,分别为(82.49±2.51)、(35.12±1.69)、(22.92±1.02)和(139.81±5.61)mmol/L,该比例的微生态制剂可保持瘤胃内容物p H在6.0~7.0之间波动。结论本实验制备的微生态制剂有利于瘤胃微生物发酵,能促进乙酸、丙酸等VFA的生成,为今后该瘤胃微生态制剂的应用奠定了基础。