响应面法优化甲烷氧化菌3011高产甲烷氧化菌素的研究

利用响应面方法对甲烷氧化菌3011发酵产甲烷氧化菌素（Mb）条件进行了优化。以Mb产量为考察指标,利用Plackett-Burman设计对影响产量的7个因素进行评价,筛选出具有显著效应的3个因素,这三个因素分别为甲醇流加量、铜离子浓度和p H。利用Box-Behnken实验设计对显著因素进行优化,得到产Mb的最优发酵培养条件为甲醇流加量54.1μmol/min,p H6.39,铜17.03μmol/L,温度30℃,接种量5×10⁶CFU/m L,通氧量30 L/h,搅拌转速400 r/min,此条件下Mb产量为3300.2μg/m L。由此可得响应面优化得到的生产工艺是提高Mb产量的可行方法。      

微生物发酵产阿魏酸酯酶及释放阿魏酸研究概述

对微生物发酵法产阿魏酸酯酶以及释放阿魏酸的国内外研究进展进行综述,重点介绍阿魏酸酯酶的微生物来源、理化性质及阿魏酸酯酶分子克隆专利,同时对释放阿魏酸的生产工艺及影响因素进行简单总结,为探讨新产品的生产工艺提供参考信息。     

脂肪酶催化合成α-生育酚阿魏酸酯

通过比较6种脂肪酶作为催化剂、4种有机溶剂和无溶剂底物作为反应介质对α-生育酚阿魏酸酯合成的影响,发现在以固定化南极假丝酵母脂肪酶B(Novozym435)作为催化剂,甲苯作为反应介质的有机溶剂体系中产率达17.7%,在无溶剂体系中产率达23.8%。和甲苯相比无溶剂体系是更理想的反应体系。通过实验确定无溶剂体系中的最佳反应条件:α-生育酚和阿魏酸乙酯的物质的量比为5∶1、水活度<0.01、加酶量与底物质量比为5%、温度为60℃、转速为180 r/m in,反应72 h时最高产率可达25.47%。向介质中添加4%的极性硅胶,反应72 h后产率达到29.2%。     

阿魏酸衍生物对食用油脂抗氧化性能的研究

采用化学及生物催化的方法合成几种具有生理活性的阿魏酸衍生物。以过氧化值(POV)为指标研究不同阿魏酸衍生物对猪油及花生油的抗氧化性能。结果表明,阿魏酸衍生物对猪油和花生油都具有一定的抗氧化作用,在这些衍生物中阿魏酸双甘酯效果最好且存在剂量效应关系；添加了阿魏酸双甘酯的猪油和花生油在20℃条件下保存,其货架保存期分别可从114d延长至300d；81d延长至258d。     

红酵母发酵废糖蜜产类胡萝卜素的研究

对红酵母利用糖蜜发酵产类胡萝卜素进行了研究,结果表明:对糖蜜的预处理的最佳酸为硫酸;利用经过酸处理后的糖蜜发酵,菌株的生物量为30.75g/L,单细胞色素含量为104μg/g,色素产量为26mg/L;最佳发酵时间为168h.使用糖蜜代替葡萄糖做廉价碳源对红酵母进行发酵,确定添加量为170g/L,色素产量最大值为葡萄糖发酵的0.97倍,生物量为1.04倍.     

金属有机骨架载体固定化生物酶的研究进展

金属有机骨架（Metal-Organic Frameworks, MOFs）是金属中心与有机配体通过配位作用自组装形成的多孔晶态材料。MOFs具有稳定性强、大比表面积、高孔隙率、可重复使用等特点,作为一种新型固定化载体材料,具有广泛的应用前景。本文主要从MOFs载体固定化生物酶的合成方法、MOFs-生物酶复合材料的特性和应用等方面进行总结分析,并对MOFs载体固定化生物酶的将来研究方向进行了展望,为后续开发研究和在生物与医药行业应用提供了理论依据。     

高产聚-β-羟基丁酸酯的甲烷氧化菌OB3b和光合菌共培养体系驯化

目的 提高甲烷氧化菌OB3b(Methylosinus trichosporium OB3b)和光合菌共培养体系中聚-β-羟基丁酸酯(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)的产量。方法 采用丰盛-饥饿间歇供料法对共生菌进行好氧开放式培养,以生长速度、PHB产量、特征性酶甲烷单加氧酶活性为主要指标,考察驯化过程中共培养体系PHB产量及甲烷氧化菌活性的变化。结果 经过4轮的丰盛-饥饿间歇供料驯化,丰盛期细胞密度可达1.2以上,饥饿期细胞密度下降速度显著降低,细胞存活率高,驯化作用明显,菌体内PHB含量从11.76%增加到37.34%(w/w),传代稳定性良好。结论 通过丰盛-饥饿间歇供料模式驯化后的共培养体系PHB产量明显提高,得到了稳定的高产PHB甲烷氧化菌-光合菌共培养体系。     

基于金纳米簇与纳米金的荧光内滤效应检测脂肪酶活性

目的 建立一种基于吐温80自氧化作用催化纳米金形成与荧光内滤机制,相对简单、快速、适用于蛋白浓度较高的游离酶的脂肪酶活性检测方法。方法 使用金纳米簇作为荧光基团,纳米金作为吸收剂,基于荧光内滤机制测定游离脂肪酶活力。设置对照试验对吐温80浓度、氯金酸浓度、温度、pH等反应条件进行优化,探索最适条件下脂肪酶水解反应时间及吐温80还原纳米金的时间并对反应体系进行抗干扰检测,验证该方法的可行性。结果 当脂肪酶酶活力在13.5～15092.0 U/L时,荧光强度的差值随脂肪酶活力的升高而增加,相关系数为0.9977,脂肪酶活力的检出限为2.34 U/L (信噪比为3)。结论 该方法操作相对简单、快速、检测范围较大、灵敏度高,具有实用性,可适用于蛋白浓度较高的游离酶的脂肪酶活力测定。     

聚β-羟基丁酸酯提取方法研究进展

聚β-羟基丁酸酯(PHB)具有生物可降解性、生物相容性等多种特性,其广泛应用于医疗组织工程和工农业等方面。由于PHB的用途广泛,其提取显得尤为重要。PHB的提取方法除了溶剂提取法、酶法、次氯酸钠氯仿提取法、高压匀浆法和珠磨法等常用方法外,还有螯合剂法、噬菌体裂解法、超声破碎法、基因工程法、直接成型法、化学法合成和从活性污泥中提取PHB等其他方法。对这些提取方法进行介绍,并展开比较分析。在未来的研究中,PHB的提取会向着更加无污染、低成本的方向发展。     

无溶剂体系脂肪酶催化制阿魏酸双油酸甘油酯

在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸乙酯)/n(油酸甘油酯)=1时,阿魏酸双油酸甘油酯的质量占生成物总质量分数较高。在1 mmoL阿魏酸乙酯,1 mmoL油酸甘油酯和70 mg脂肪酶组成的无溶剂反应体系中,50℃空气浴振荡120 h,总产率可达63.32%,其中阿魏酸双油酸甘油酯质量占生成物总质量的63.37%。