甲拌磷残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制

研制用于检测甲拌磷残留量的间接竞争ELISA试剂盒。甲拌磷包被抗原的最佳工作质量浓度为4mg/L,抗体的最佳稀释倍数为8000,甲拌磷多克隆抗体交叉反应率小于20%,甲拌磷抑制率回归曲线为y=18.846x＋6.9949,在1～5000μg/L范围内呈线性关系,检测限为4.90μg/L,IC50为191.37μg/L。甲拌磷试剂盒的添加回收率均高于75%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于10%。试剂盒在4℃或－20℃下有效期为270d。     

咪唑乙烟酸人工抗原的合成与鉴定

[目的]合成咪唑乙烟酸完全抗原并加以鉴定。[方法]以除草剂咪唑乙烟酸原药、草酰氯以及六氨基己酸等为起始原料,通过亲核取代、水解等反应合成了咪唑乙烟酸的半抗原。用碳二亚胺法将半抗原与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,用混合酸酐法将半抗原与鸡卵清蛋白偶联制备包被原。[结果]半抗原的结构经IR、UV、1H NMR以及HPLC-MS确证。经紫外光谱分析,计算得出半抗原与牛血清白蛋白和鸡卵清蛋白的结合比为18∶1和7∶1。[结论]紫外光谱分析证实咪唑乙烟酸抗原合成成功,该抗原可用于咪唑乙烟酸多克隆抗体和ELISA检测试剂盒的研制。