蓖麻毒素B链的克隆表达与鉴定

采用PCR法扩增出蓖麻毒素B链基因,并将其与PMD18-T克隆载体相连接,经序列分析正确后插入到表达载体PET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-RTB,将构建好的重组质粒转化入BL21感受态中,经IPTG于37℃诱导表达后,得到的融合表达的目的蛋白质经SDS-PAGE分析,相对分子质量约为31 000,利用Western与间接ELISA鉴定证明,其具有抗原性,为制备RTB单克隆抗体及提高检测方法的敏感性打下基础.     

离子液体[bmim]BF_4与溶剂DMSO相互作用的研究

在298.1~323.15 K范围内,测定了1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体([bmim]BF4)与DMSO混合体系的密度和粘度,研究发现:随着DMSO加入量的增加,混合体系的密度和粘度均减小。在此条件下,计算了此离子液体的粘度活化参数,η∞、Ea、性粘度B-系数及过量对数粘度,结果表明:Ea与DMSO的摩尔分数成线性关系,线性方程为:Ea=-0.836xDMSO+2.587(r=0.98),粘度B-系数随温度的升高而减小,[bmim]BF4-DMSO混合体系的过量对数粘度在全组成范围内均为正值。     

离子液体[bmim]BF4与溶剂DMS0相互作用的研究

在298.1～323.15 K范围内,测定了1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体([bmim]BF4)与DMSO混合体系的密度和粘度,研究发现:随着DMSO加入量的增加,混合体系的密度和粘度均减小.在此条件下,计算了此离子液体的粘度活化参数,η∞、Ea、性粘度B-系数及过量对数粘度,结果表明:Ea与DMSO的摩尔分...     

RTA和RTA-KEEL/KDEL基因的表达及细胞毒性

目的构建蓖麻毒素A链(RTA)和RTA-KEEL/KDEL基因表达载体,并检测重组蛋白的细胞毒性作用。方法用PCR法从蓖麻毒素基因组中扩增出RTA及RTA-KEEL/KDEL基因,连接T载体,测序正确后,定向插入质粒pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-RTA和pET-28a-RTA-KEEL/KDEL,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。结果所表达的RTA及RTA-KEEL/KDEL非融合蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量约为31000,Westernblot分析具有反应原性,MTS法检测,RTA-KEEL/KDEL对CHO细胞具有比RTA更强的杀伤作用。结论已成功构建RTA和RTA-KEEL/KDEL表达载体,表达的重组蛋白具有生物学活性。     

槲皮素在离子液体[bmim]PF6修饰碳糊电极上的电化学行为

用[bmim]PF6和液体石蜡的混合溶液代替纯液体石蜡作为粘合剂修饰碳糊电极,采用循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)研究了QUE在电极上的电化学行为,测定了电极反应的有关参数,探讨了反应机理,并对合成样品中的槲皮素进行了分析测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定卤肉中3种β-受体激动剂残留

建立卤肉中3种β-受体激动剂(克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇)残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法。样品经β-盐酸葡萄糖醛甙酶/芳基硫酯酶水解,MCX固相萃取柱净化,以乙腈-0.1%甲酸溶液作为流动相洗脱,采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行采集,外标法定量。结果表明：3种β-受体激动剂在1～100ng/mL质量浓度范围内呈现良好的线性关系,R2均大于0.99,方法检测限均为0.25μg/kg,从0.5、1μg/kg和2μg/kg添加水平检测结果可以看出,方法平均回收率为80%～120%,相对标准偏差为1.0%～10.0%。     

一种用于农产品检测的快速样品前处理技术超高效液相色谱-串联质谱法检测红枣中4种链格孢霉毒素

建立了一种用于农产品检测的快速样品前处理技术(QuEChERS)方法检测红枣中腾毒素(Ten)、链格孢霉素(ALT)、链格孢酚甲基乙醚(AME)和链格孢酚(AOH)4种链格孢霉毒素(ATs)的超高效液相色谱-串联质谱方法。红枣样品经(体积分数为1.5%)甲酸乙腈溶液提取,QuEChERS方法净化;4种ATs经十八烷基三氯硅烷(C_(18))分析色谱柱分离,以(体积分数为0.1%)甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱;以电喷雾离子源、正离子、多反应监测(MRM)模式检测,空白基质标准工作曲线进行定量。在优化的实验条件下,4种ATs在0.2～200μg/L质量浓度范围内呈现良好的线性关系(R~2>0.999),方法检出限和定量限分别为1和2μg/kg。在4种ATs的质量浓度为5,10,15μg/kg,n=6的条件下,平均回收率均为78.9%～112%,相对标准偏差(RSD)为1.1%～7.0%。     

蟠桃-葡萄-黑枸杞复合饮料的配方优化

以黑枸杞、蟠桃和葡萄(质量比1∶3∶3)为主要原料,以感官评分为考察指标,采用单因素试验和响应面法结合模糊数学综合评价法优化蟠桃-葡萄-黑枸杞复合饮料的配方。结果表明,添加木糖醇1%、三氯蔗糖0. 001 4%、罗汉果甜苷0. 001 4%、柠檬酸0. 1%(均为质量分数),复合饮料感官评分为(8. 38±0. 03),与模型理论值接近。此条件下制得的复合饮料色泽亮丽、香气宜人、酸甜可口,糖酸比4. 2∶1、花青素含量为144μg/m L、总糖11. 2 g/100 g、总酸3. 4 g/100 g,且富含13种氨基酸。此款复合饮料色泽口感较佳,组织状态稳定。     

UPLC-MS/MS法测定葡萄干中6种人工合成甜味剂

该试验旨在建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定葡萄干中安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、阿力甜和纽甜6种人工合成甜味剂的测定方法。样品经0.1%甲酸水提取,采用C₁₈色谱柱分离,以0.05%甲酸水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾离子化,负离子扫描和多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。结果表明,6种甜味剂在1~200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。6种甜味剂的方法检出限为1~2μg/kg,方法定量限为2.5~5μg/kg;在10,20和100μg/kg 3个添加水平下,平均回收率在81.5%~106.7%之间,相对标准偏差为1.7%~6.9%(n=6)。该方法简单、灵敏度高、分析时间短,适用于葡萄干中6种人工合成甜味剂的测定。     

模糊数学结合响应面法优化番茄调味酱的配方

为得到更科学、客观的评价结果,采用模糊数学感官评定法与响应面法结合,研究番茄调味酱的最优配方。制作过程中,复合调味料按3%干辣椒块、2%味精、5%辣椒粉、0.1% 5'-呈味核苷酸二钠,4%蒜丁、4%姜丁、3%白醋、3%酱油、5%白砂糖调配,并添加辅料花生碎5%,选择原味番茄酱添加量、植物油添加量、盐添加量、豆豉添加量4 个影响因素,在单因素实验基础上,进行响应面优化试验,得到最佳工艺配方。结果表明,最优工艺配方为:原味番茄酱添加量21%、植物油添加量37%、盐添加量1%、豆豉添加量9%,在此条件下,番茄调味酱感官评分预测值为8.60分,验证试验得到实际感官评分平均值为8.54±0.02分;与理论预测值相比,其相对误差为0.68%。理化和微生物检测结果显示,番茄调味酱的各项理化及微生物指标均符合国家标准。此试验结果为番茄调味酱工业化生产提供理论依据。