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探讨以纤维二糖为底物合成海藻糖的可行性。首先克隆来自施氏假单胞菌A1501的otsA/otsB基因,外源导入Escherichia coli BL21(DE3)构建以葡萄糖为底物合成海藻糖的OtsAB途径。继而通过过表达E. coli本身的galU基因增加海藻糖合成前体物质尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的含量,使海藻糖产量提高了3 倍。通过添加井冈霉素抑制海藻糖的降解,进一步提高海藻糖的产量。在此基础上,过表达来自天然纤维素分解细菌Saccharophagus degradans的纤维二糖磷酸化酶基因cepA,使重组大肠杆菌具有利用纤维二糖产海藻糖的能力。利用该重组大肠杆菌全细胞催化生产海藻糖,底物为20 g/L纤维二糖,并添加0.05 mmol/L的井冈霉素抑制海藻糖降解时,48 h后可生成1.3 g/L的海藻糖。本研究利用重组大肠杆菌以纤维二糖为底物合成海藻糖,证实了以纤维二糖为底物合成海藻糖的可行性,为纤维二糖来源精细化学品的生产提供了新的思路。 相似文献
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建立了低聚果糖样品中的葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的高效阴离子交换色谱-脉冲安培法的定量分析方法。采用阴离子交换柱CarboaPacTM PA10(250 mm×2 mm)脉冲安培法进行检测,以氢氧化钠和醋酸钠为淋洗液进行梯度洗脱,柱温30 ℃,流速0.3 mL/min。结果表明,葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖在质量浓度0.1~10 mg/L范围内的线性关系良好,相关系数r2大于0.996 1,各组分的相对标准偏差均在2.69%~7.21%之间。将此方法应用于菊粉酶解后反应产物的检测,结果表明该方法快速简便且灵敏度高,能满足反应样品中低聚果糖的检测要求。 相似文献
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共表达D-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌能够催化苯基丙酮酸生产D-苯基乳酸。为了进一步提高D-苯基乳酸的产量,本研究优化了重组大肠杆菌全细胞转化的反应条件。结果表明,当pH为5.5~6.0、底物浓度为50~60 m M、菌体浓度为OD600 nm=75时,D-苯基乳酸产量最高,分批补加苯基丙酮酸时最高D-苯基乳酸产量达114 m M。 相似文献
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分别采用有机溶剂萃取法、超滤法、大孔树脂吸附法、离子交换法分离提取亚硫酸氢镁预处理麦秆废液中的木质素磺酸盐和低聚木糖。研究结果表明超滤法不能达到分离目的,有机溶剂沉淀和大孔树脂吸附可实现木质素磺酸镁的纯化,采用D380离子交换树脂进行离子交换层析可将废液中低聚木糖和木质素磺酸镁完全分离,回收所得低聚木糖和木质素磺酸盐纯度分别可达63.95%和91.28%。因此,D380树脂固定床离子交换法是一种简单有效的提取废液中高附加值产品的方法,可实现亚硫酸氢镁预处理麦秆废液的高值化利用,具有强劲的市场应用潜力。 相似文献
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为进一步提高凝结芽孢杆菌发酵木糖生产L-乳酸的产量和转化率,以实验室保存的一株能利用木糖产L-乳酸的野生型凝结芽孢杆菌菌株NL01为出发菌株,通过等离子体诱变育种技术和平板菌落初筛、摇瓶复筛,最终得到一株木糖耐受力强、L-乳酸产量高、遗传特性稳定的正向突变菌株NL-CC-17。该突变菌株是目前已报道的木糖耐受力最高的菌株。当以100 g/L的木糖为底物,50 ℃发酵72 h后,L-乳酸产量达到82.30 g/L,糖酸转化率为92.37%,L-乳酸产量较出发菌株提高21.51%,糖酸转化率提高了16.00%。通过初步优化发酵条件,确定该菌株最佳发酵温度为50 ℃,实验范围内最佳发酵pH值为5.5。 相似文献
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生物化学是普通高校生物类专业的重要基础课程,多学科融合及知识更新迅速的特点决定了其教学难度,为了提高生物化学教学水平,我们从学生兴趣的培养,理论教学及实验教学等方面进行了初步的探索并且在实践中取得了理想的效果。 相似文献
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分别采用有机溶剂萃取法、超滤法、大孔树脂吸附法、离子交换法分离提取亚硫酸氢镁预处理麦秆废液中的木质素磺酸盐和低聚木糖。研究结果表明超滤法不能达到分离目的,有机溶剂沉淀和大孔树脂吸附可实现木质素磺酸镁的纯化,采用D380离子交换树脂进行离子交换层析可将废液中低聚木糖和木质素磺酸镁完全分离,回收所得低聚木糖和木质素磺酸盐纯度分别可达63.95%和91.28%。因此,D380树脂固定床离子交换法是一种简单有效的提取废液中高附加值产品的方法,可实现亚硫酸氢镁预处理麦秆废液的高值化利用,具有强劲的市场应用潜力。 相似文献
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