以培养检验思维能力为导向的生物化学检验教学改革探究

生物化学检验是医学检验技术专业的核心课程之一,由于此学科具有复杂性、广泛性与应用性等特点,导致教师教学中难度较大。通过应用多元化教学模式等教学改革措施,可以使学生在学习生物化学检验基本理论的同时将理论应用于临床实际技能中。对以培养检验思维能力为导向的生物化学检验教学改革的作用、方法及效果进行探讨,仅供参考。     

地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用

目的制备地高辛(digoxigenin,DIG)标记的Nkx2. 1基因RNA探针,用于小鼠胚胎早期神经管发育关键时期Nkx2. 1基因表达的检测。方法巢式PCR法扩增Nkx2. 1基因,将其克隆至pGEM-T载体;以其为模板,通过Nkx2. 1特异性引物,PCR扩增RNA探针转录模板;采用T7 RNA聚合酶,制备DIG标记的正义、反义Nkx2. 1 RNA原位杂交探针。经全胚胎原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)技术分析胚胎8. 5、9. 5、10. 5 d小鼠体内Nkx2. 1基因的表达情况。结果制备的探针浓度为1 521. 986 ng/mL,纯度A260/280=2. 39。Nkx2. 1基因反义探针能高效检测到Nkx2. 1基因在胚胎8. 5、9. 5及10. 5 d小鼠神经系统中表达,正义探针未能检测到表达信号。结论成功制备了特异高效的DIG标记的Nkx2. 1基因RNA原位杂交探针,为进一步研究Nkx2. 1基因在小鼠胚胎组织中的表达,探索其在神经管发育中的作用机制奠定了基础。