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葡萄籽原花青素提取物对砷诱导人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对砷诱导的人肝细胞 HL-7702损伤的保护作用及其机制,为砷中毒的防治和GSPE的抗氧化研究提供理论依据。方法:将人肝细胞HL-7702 分为对照组、砷染毒组(25 μmol/L)、GSPE干预组(5、10、25、50 mg/L)以及GSPE单独干预组(50 mg/L), 分别处理24 h和48 h后,分别测定天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、丙氨酸氨基转移酶 (alanine aminotransferase,ALT)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)变化。噻 唑蓝(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)法分析细胞生存率,利用实时定量聚 合酶链式反应以及Western blot法检测HL-7702细胞中核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)、血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷 胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)的mRNA以及蛋白表达。结果:MTT实验发现,与对照组比 较,高浓度砷(≥25 μmol/L)染毒组细胞存活率显著降低(P<0.05)。GSPE干预组(>10 mg/L)细胞中的ALT 和AST活力、MDA水平显著低于砷染毒组(P<0.05),SOD活力、GSH含量以及T-AOC水平显著高于砷染毒组 (P<0.05),GSPE干预组HL-7702细胞中Nrf2、HO-1、NQO1、GST的mRNA及蛋白表达增高(P<0.05)。结 论:GSPE对砷诱导的人肝细胞HL-7702氧化损伤具有拮抗作用,且具有一定的剂量效应关系,其机制可能是通过 激活Nrf2介导的抗氧化信号通路,提高细胞抗氧化能力,从而改善砷引起的肝损伤。 相似文献
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一、云南概貌云南以地处云岭以南得名,简称滇。位于我国西南边疆,南部西部与越南、老挝、缅甸三国接壤。全省海拔南部最低76.4米,往北逐渐升高,最高达到6740米。地形地貌复杂,西北多高山峡谷,东北起伏较缓和。气候多样。 相似文献
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目的:探讨葡萄籽提取物原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)诱导人食管癌细胞ECA109凋亡的效果及机制。方法:ECA109细胞用0、25、50、100、200、400 μg/mL GSPE干预24 h,噻唑蓝法检测并计算不同质量浓度GSPE对ECA109细胞的活性抑制情况,选取半数抑制浓度(50 μg/mL)作为干预剂量;流式细胞技术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附检测法测定炎性因子及Bax/Bcl-2表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,qPCR)、Western blot检测核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达情况。结果:不同质量浓度GSPE作用24 h均可抑制ECA109细胞的增殖,细胞凋亡率由54.44%增加到82.80%;酶联免疫吸附检测结果显示,相比于空白对照组,GSPE和NF-κB抑制剂BAY11-7082可显著抑制细胞内炎性因子前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的产生以及C型反应蛋白(C reactive protein,CRP)的分泌(P<0.05);qPCR和Western blot结果表明GSPE和BAY11-7082处理使Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),NF-κB信号通路中IκB、p65、p50 mRNA表达量显著降低(P<0.05),p-IκB、p65、p50相对表达量显著下降(P<0.05)。结论:GSPE可通过抑制PGE2、CRP的产生诱导ECA109细胞凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路、活化Bax有关。 相似文献
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目的 探讨蝎毒活性多肽(SVAP)抗栓作用机制。方法 酶消化法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),放射免疫分析法测定HUVEC 培养液中6-Keto-PG F1α的含量以反映PGI2 的变化, 硝酸还原酶法测定NO 的含量。结果 SVAP 1、5、10、20 mg·L-1均可明显增加HUVEC PGI2 的释放, 而SVAP 1、5 mg·L-1 对NO 的释放无明显影响,SVAP 10、20 mg·L-1 可使NO 释放量显著增加,PGI2 和NO 释放量之间呈正相关。结论 SVAP抗栓机制可能与影响VEC 合成或(和)分泌PGI2,NO 以及NO 与PGI2 二者之间协同及相互介导作用有关。 相似文献
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