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目的建立腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1(JL1)反向遗传系统,获得单一成分的拯救病毒JL1~R。方法将JL1全长c DNA基因序列分为7个片段(F1~F7),在F7片段的3′端引入丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D virus ribozyme,Hdv RZ),分段合成后分别插入载体pT7-MCS3中,根据每段重叠区域的酶切位点拼接,构建全长表达质粒pT7-MCS3-MUV_(JL1)(HdvRz);同时构建表达腮腺炎病毒(mumps virus,MuV)核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、聚合酶蛋白(L)的3个辅助质粒;将全长表达质粒与3个辅助质粒及表达T7RNA聚合酶的质粒pCDIBP-T7RNAP共同电转染Vero细胞。对获得的病毒JL1~R进行测序、病毒滴度及中和抗体测定。结果拯救病毒JL1~R基因组SH及HN片段与疫苗株JL1对应片段的理论序列一致;JL1~R经Vero细胞连续传代培养2~10代病毒滴度均在6 lg CCID_(50)/mL以上;JL1~R与疫苗株S_(79)诱发抗MuV抗体滴度接近。结论成功构建了MuV疫苗株JL1的反向遗传操作系统,获得的单一成分拯救病毒JL1~R可作为腮腺炎疫苗株的备选株,解决了S_(79)疫苗生产中毒种及疫苗株的成分、纯度和批间一致性等问题,进一步提高了国内腮腺炎疫苗的免疫效果。 相似文献
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在政府提出的"三旧改造、退二进三"的改造政策指导下,优化整合土地资源,合理运用现有资源,追求资源的极限利用是企业实现产业升级、不断走向壮大的重要一步。办公楼主入口大堂室内设计应提倡绿色环保和可持续发展,坚持吸收企业文化以及本地、本民族和民俗的母体文化特色,通过大堂空间设计充分诠释企业产品精神、文化底蕴和发展理念,从而树立企业良好形象、提升企业创新品牌。 相似文献
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为了提高海藻酸钙胶珠的稳定性,采用海藻酸盐的改性材料ALG-g-Lys制备微胶珠,通过单因素考察结合正交设计优化了ALG-g-Lys微胶珠的制备工艺。优化后的制备工艺为:ALG-g-Lys 浓度为15g/L,电压为8.0kV,推进速度为30mm/h,针头型号为24G,CaCl2浓度为15g/L。优化后制得的微胶珠粒径均匀,球形度好,拖尾率、半球率和小球率小,平均粒径为253±40μm。该工作提供了一种新型的载体材料替代海藻酸盐作为凝胶材料,未来可适用于医药、食品行业等领域。 相似文献
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