基于SPAMS研究汕头市潮阳区春冬季污染天气过程的细颗粒物组分变化特征

为了更好地了解空气污染过程中细颗粒物组分的变化特征,采用单颗粒气溶胶质谱(SPAMS)法,于2015年2月在汕头市潮阳区城南街道办事处六楼对空气污染过程进行连续观测。根据细颗粒物的质谱特征,将其化学组分分为9类,为元素碳(EC)、混合碳(ECOC)、富钾颗粒(K)、富钠钾颗粒(NAK)、重金属(HM)、矿物质(SIO3)、有机碳(OC)、高分子有机碳(HOC)以及左旋葡聚糖颗粒(LEV)。将本次污染过程分为6个时段进行分析,结果表明各个阶段中占比最大的化学组分均为OC、EC、ECOC,这三种化学组分的总占比达到58. 7%～73. 6%。在空气污染上升和持续阶段,OC和ECOC占比增长明显(尤其是OC),OC是这两个阶段中占比最大的化学组分,占比分别达到27. 8%和32. 5%,这两类细颗粒物是本次空气污染过程中的特征组分。本次污染过程中,机动车尾气源在空气优良时段贡献率最大,而在空气污染上升和持续阶段燃煤源贡献率最为显著,占比分别达到32. 9%和41. 5%,这是本次空气污染过程的一个突出特点,燃煤源是本次空气污染过程的主要来源。综合污染过程成分分析、来源分析及气象条件可得出,潮阳区本次持续污染过程主要是由于气象扩散条件不利,风速小,湿度大,燃煤源颗粒富集过多导致污染升级。建议在重污染天气时可优先考虑加强对燃煤源采取管控措施。     

原核表达抗克伦特罗重组单链抗体及其纯化研究

目的:原核表达抗克伦特罗重组单链抗体,对表达的包涵体蛋白进行提取和纯化,并鏊定重组抗体特性.方法:通过温度诱导大肠杆菌表达抗克伦特罗单链抗体,超声破碎菌体细胞,采用不同洗涤溶液提取包涵体.以不同变性剂溶解包涵体,Ni-NTA亲和柱纯化后,经脉冲稀释法将其复性.超滤及透析浓缩蛋白复性液,经Ni-NTA亲和柱二次纯化,得到纯化重组目的蛋白.通过SDS-PAGE电泳分析重组目的蛋白纯度,采用Western bloning和间接竞争EUSA对所制备的抗克伦特罗重组单链抗体特异性进行鉴定.结果:以大肠杆菌Es-cherichia coli BL21(DE3)为宿主菌诱导表达重组单链抗体,产率最高,占菌体蛋白的31%.以1 mol/L尿素洗涤包涵体,6 mol/L盐酸胍为变性剂,经Ni-NTA亲和柱纯化,所得复性重组单链抗体蛋白的纯度达96%.Western blotting分析显示,纯化并复性后的单链抗体可与鼠抗His标签蛋白单克隆抗体发生特异性的结合反应.间接竞争ELSIA结果表明,该重组抗体IC50值为3.35 ng/mL,与沙丁胺醇等结构类似物无交叉反应.结论:原核表达制备的抗克伦特罗重组单链抗体具有较好的抗原结合活性及特异性,为进一步开展克伦特罗的免疫快速检测研究奠定基础.     

气相色谱法测定非甲烷总烃的研究

用玻璃注射器(气袋)采集气体样品,以双柱单氢火焰离子化检测器的气相色谱仪直接进行测定。进样1.0 mL样品分别进入汽化室的总烃柱和甲烷柱中,由于这两个柱子填充材料和长短差异,总烃先在FID上产生响应,然后甲烷在FID上产生响应。总烃的浓度扣除甲烷浓度和除烃空气氧的浓度值,即可得到非甲烷总烃(NMHC)的浓度,可以实现单次进样,同时完成总烃、甲烷、非甲烷总烃浓度的测定。文章研究1.37～22.3 mg/m3浓度甲烷标准气,得出甲烷标准曲线方程为Y=715X+829,r=0.9990,相对标准偏差为0.26%～1.8%,总烃标准曲线方程Y=695X+724,相对标准偏差为0.35%～1.4%,除烃空气(O2-N2,20.8%)相对标准偏差为0.75%。该法用于环境空气和固定污染源有组织排放中NMHC含量分析,操作简单,实验结果满意。     

抗克伦特罗单链抗体在毕赤酵母GS115中的表达

构建表达抗克伦特罗单链抗体(CBL scFv)的毕赤酵母菌株,筛选高拷贝转化子并诱导CBL scFv在毕赤酵母中的分泌表达。将构建的含有CBL scFv基因的重组真核表达载体pPICZαA-CBL经BstX I酶切线性化后,利用电转化方法转化毕赤酵母菌GS115感受态细胞,通过Zeocin抗性平板筛选高拷贝转化子,以甲醇诱导蛋白表达,对表达产物进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定及ELISA活性分析。结果显示,通过筛选出的重组毕赤酵母菌株分泌表达了1个分子量约为41kDa的蛋白,该蛋白可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合,且可被游离的CBL竞争性抑制,IC50值为5.1ng/mL。经检测,重组抗体表达量为0.095g/L。这说明分泌表达CBL scFv的毕赤酵母菌株构建成功,为后期CBL scFv发酵与制备奠定了基础。