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目的研制可用于扎伊尔型埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)核酸检测试剂质量评价的国家参考品,并建立相关试剂的质量标准。方法通过分子生物学方法制备含有5种EBOV核蛋白和糖蛋白基因目的片段的RNA噬菌体颗粒、质粒菌液和RNA体外转录产物作为参考品候选样本,使用6种出血热病毒、虫媒病毒培养液和含拉沙热病毒核蛋白和糖蛋白基因的质粒菌液作为阴性参考品候选样本。分别应用培养法和荧光定量PCR确定病毒滴度和核酸浓度,应用RT-PCR、荧光定量PCR对候选样本进行序列鉴定和交叉污染检查。采用RNase A和DNaseⅠ抵抗试验确认RNA噬菌体颗粒的包装完整性。对于序列正确、无污染的候选样本进行稀释分装,发放5家EBOV核酸检测试剂生产企业进行适用性验证,根据结果确定参考品盘的阳性、阴性、最低检测限和精密度组成及试剂质量标准。结果RNA噬菌体颗粒包装的RNA序列与预期完全一致,颗粒包装完整且内含DNA残留污染低于RNA含量的1/10 000,可以用于制备参考品。经适用性验证,确定国家核酸参考品盘包括4份阳性、16份阴性参考品(其中8份型别特异性参考品)、14份最低检测限和2份(4支)精密度参考品,均为冰冻样本。适用性验证结果显示,各申报试剂均能检出扎伊尔型EBOV核酸,但最低检测限存在一定差异。结论建立的扎伊尔型EBOV核酸检测试剂国家参考品适用于现有的5家已申报应急审批的扎伊尔型EBOV核酸检测试剂,可用于相关试剂的质量控制,且对于该类试剂的研发具有重要指导意义。  相似文献   
2.
金兰  陈苏红 《现代信息科技》2023,(13):189-193+198
分析传统的Python程序设计课程教学存在的不足,提出“工作过程系统化”课程设计理念,重构教学内容,以案例驱动为主线,以问题为导向,将知识融入案例教学中;构建基础级、理解级和应用级三级Python应用生态,帮助学生理解知识的应用场景;按照知识、任务情景、任务描述和版本迭代四个步骤更新教学方式;采用线上线下混合教学模式,引入互动讨论、翻转课堂等环节激发学生的学习热情。经实践证明,取得了较好的教学效果。  相似文献   
3.
为了实现无自旋交换弛豫态(SERF)原子自旋陀螺仪高精准、高稳定的测温目标,文章提出了一种改进的四线制比例测温方法.选用超高精度FRSM金属箔电阻,通过比例测量的方式抑制温漂,同时采用高阶数字滤波器降低噪声,大大提高了系统的测温精度.测试结果表明,该方法的测温精度高达0.01℃,漂移量小于0.01℃,实现了多通道的温度...  相似文献   
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