出芽短梗霉发酵生产聚苹果酸的研究

为研究芽短梗霉生物合成聚苹果酸的优化工艺条件,采用间歇培养法研究聚苹果酸的发酵过程。测定出芽短梗霉细胞生长和聚苹果酸产物生成曲线,并考察碳源、氮源、CaCO3、pH、摇床转速等因素对聚苹果酸生成的影响,得出出芽短梗霉发酵生产聚苹果酸的优化工艺条件是:葡萄糖120g/L,丁二酸铵3g/L,CaCO330g/L,pH5.5,摇床转速220r/min,温度25℃,发酵培养6d。在此工艺条件下,聚苹果酸的产量达到16.58g/L。聚苹果酸和出芽短梗霉菌体生长呈现一定的相关性。     

重组人γ-干扰素包涵体稀释复性

采用稀释法研究了重组人γ-干扰素包涵体复性条件,如温度、pH值、蛋白浓度、复性液中脲浓度,同时对加样操作方式进行了考察,得到了较为适宜的复性条件.结果表明,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集,合适的脲浓度随复性蛋白浓度的增加而有所增大,在4℃、pH值8.0、脲浓度1.0mol•L^-1、蛋白浓度0.1mg•ml^-1及脉冲加样操作方式等条件下,复性后重组人γ-干扰素的活性为2.39×10⁵ IU•ml^-1,比活达2.21×10⁷ IU•mg^-1.     

脲梯度扩张床吸附层析复性重组人γ-干扰素

针对固定床吸附层析技术用于蛋白质体外重折叠复性时,折叠聚集中间体易聚集造成床层堵塞等问题,将扩张床吸附层析技术应用于重组人γ-干扰素包涵体蛋白质的复性研究,并与脲浓度线性梯度法相结合,考察了脲梯度长度和脲终浓度对重组人γ-干扰素复性的影响.复性后的重组人γ-干扰素的纯度达90%;较长的脲梯度长度和合适的脲终浓度有利于蛋白质的复性;在较优的实验条件下,复性后的重组人γ-干扰素收率为53.7%,比活达9.75×106 IU/mg.脲梯度扩张床吸附层析法具有处理量大的优点,能有效地复性重组人γ-干扰素包涵体,并能实现复性和分离包涵体蛋白质过程的集成化.     

纤维素酶法提取富硒灵芝菌丝体多糖的研究

采用纤维素酶法,研究了纤维素酶分离提取富硒灵芝菌丝体多糖的条件,以提高菌丝体多糖的得率.利用正交试验设计,确定了优化的提取条件,即浸提加水量50 mL/g菌丝体,酶解时间80 min,加酶量300 U/mL,pH 4.5,温度55℃.在优化的实验务件下,菌丝体多糖的得率33.6%.利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化菌丝体多糖,多糖的回收率达82.8%.     

高黏度壳聚糖回收鱼糜漂洗液中蛋白质的研究

本文首次利用高黏度壳聚糖（黏度>400 mPa·s）回收鱼糜漂洗液中的蛋白质,探讨其影响因素,以获得优化的回收工艺条件。通过单因素试验研究了温度、pH、作用时间、壳聚糖浓度对蛋白质回收率的影响,并在此基础上做正交试验,得出优化的试验条件。采用双缩脲法测定蛋白质浓度,重铬酸钾法测定COD。试验结果表明：在优化的试验条件下：pH 6.5,温度20 ℃,作用时间90 min,壳聚糖质量浓度1.67 mg/mL,高黏度壳聚糖对鱼糜漂洗液中蛋白质回收率达43.68%,COD去除率为22.73%。     

酶法制备龙头鱼水解蛋白的研究

采用先添加碱性内切蛋白酶(Alcalase),再添加风味蛋白酶(Flavourzyme)及活性炭脱苦的方法,研究制备龙头鱼水解蛋白的工艺条件.以提高水解蛋白得率.利用正交试验设计.对蛋白酶的水解条件及活性发脱苦务件进行优化;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定水解产物的平均分子质量;利用氨基酸自动分析仪测定水解产物的氨基酸组成.结果表明,在优化的水解条件下.龙头鱼蛋白的水解度达17.68%;在活性炭的作用下,龙头鱼蛋白水解产物可基本脱除苦味;水解产物的平均分子质量为1 430Da,由13个氨基酸残基组成;水解产物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的34.9%,谷氨酸等呈味氨基酸含量占游离氨基酸总量的27.6%.     

复合酶法水解鱿鱼蛋白及水解产物的研究

采用复合酶(Alcalase碱性内切蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶)水解鱿鱼蛋白,并对水解产物进行了研究.利用正交试验设计,对Alcalase的水解条件进行了优化;考察了防腐剂、Flavourzyme对水解度的影响;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定了水解产物的相对分子质量,并分析了氨基酸组成.结果表明,Nisin对水解度没有不利影响,Flavourzyme能有效提高鱿鱼蛋白的水解度,在优化的水解条件下,鱿鱼蛋白水解度达20.11%,水解产物的平均分子量为1180 u,约由9.2个氨基酸残基组成.水解产物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的38.4%,天冬氨酸和谷氨酸等鲜味氨基酸占氨基酸总量的26.3%.     

富硒灵芝液态深层发酵工艺研究

采用灵芝作为富硒的载体,进行富硒灵芝液态深层发酵实验,研究灵芝对无机硒的生物转化能力。利用正交实验设计,对富硒灵芝液态深层发酵条件如摇床转速、接种量、pH等进行了优化。结果表明,灵芝能在含有低浓度亚硒酸钠(50～200mg/kg)的培养基中生长,并在菌丝体内富集硒。在优化的发酵条件下,富硒灵芝菌丝体干质量为38.0g/L,菌丝体硒含量为1568μg/g,总富硒量为59584μg/L。     

人γ-干扰素基因工程菌培养条件的研究

对表达重组人γ-干扰素的基因工程菌的培养条件进行了较详细的研究．确定了最佳的培养及诱导时间，并利用正交试验设计，对影响工程菌生长和重组人γ-干扰素表达的条件如培养基中葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物的量及摇床转速、装液量、接种量、pH等进行了优化．结果表明，在优化条件下，表达的γ-干扰素包涵体占菌体总蛋白的60％以上，每升发酵液可获得包涵体约为1．6g．     

带鱼水解蛋白的酶法制备及其性质研究

采用复合酶(木瓜蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶)制备带鱼水解蛋白,并对其性质进行了研究.考察了水解时间、防腐剂、加酶总量、酶比例、温度、pH等因素对蛋白质水解度的影响;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定了水解产物的相对分子质量;利用氨基酸自动分析仪,对水解产物的氨基酸组成进行了分析.结果表明,在优化的水解条件下,水解度达27.36%;Nisin对水解度没有不利影响.水解产物的平均分子量为803Da,约由6.3个氨基酸残基组成.水解产物含有赖氨酸等必需氨基酸,含量占氨基酸总量的36.8%.低分子肽是带鱼水解蛋白的主要成分,构成肽的氨基酸占总氨基酸的比例为97.6%.