小鼠单克隆抗体IgM Fabμ片段的制备

本文介绍了小鼠单克隆抗体IgM小分子活性片段的制备方法。在37℃和4℃下用胰蛋白酶消化IgM 4和24小时,其小片段用碘代乙酰胺烷基化,用Sephacryl S-200柱层析纯化。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实:在37℃用胰酶裂解IgM,小片段分子量近50000(Fab),但其免疫活性较低:在4℃胰酶裂解IgM,小片段分子量为80 000～110 000(Fabμ),免疫活性与原IgM基本一致。我们用Fab μ片段与辣根过氧化物酶连接,其结合物用于双抗体夹心酶联免疫吸附试验,取得了满意的结果。