乙二胺四乙酸二酐对草酸脱羧酶的修饰改性

为提高草酸脱羧酶（Oxdc）在预防治疗泌尿系结石症方面的稳定性和应用性能,采用乙二胺四乙酸二酐（EDTAD）对Oxdc进行化学修饰,并初步优化了修饰条件：当修饰反应时间为8 h、EDTAD/Oxdc的摩尔比为50:1、反应pH为7.0、反应温度为37℃时,修饰率为71.91%,酶活回收率为75.42%。聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和超高效液相色谱-质谱（UPLC-MS）联用分析证明Oxdc和EDTAD共价结合成功。紫外-可见吸收光谱（UV）和圆二色性光谱（CD）分析结果表明,修饰后Oxdc的空间结构发生了一定程度的改变。同时,部分酶学性质研究表明,经EDTAD修饰后的Oxdc较游离的Oxdc,最适pH向碱性方向偏移了约1.5个单位,耐热性和耐胰蛋白酶酶解的能力均显著增强。此外,修饰后的Oxdc在草酸钙上的吸附量明显提高。结果说明修饰后的Oxdc的稳定性显著增强,应用性能有所改善。     

草酸脱羧酶促进草酸钙结晶溶解的体外研究

在体外实验条件下,考察了加酶量、反应pH值、反应温度及其产物甲酸根等因素对草酸脱羧酶催化草酸降解从而促进草酸钙结晶重新溶解过程的影响。结果表明,在10 mL反应体系中,添加4 U草酸脱羧酶,反应pH 3.0,反应温度为37 ℃,反应进行1 周（168 h）,可使近5%的草酸钙结晶重新溶解;实验结果表明,草酸降解产物甲酸根对草酸脱羧酶促进草酸钙结晶溶解产生抑制作用。     

草酸脱羧酶的性质及应用研究进展

草酸脱羧酶（oxalate decarboxylase,Oxdc）属Cupin蛋白超家族,是一种包含Mn2+的均一聚合酶,能够在没有辅因子的条件下催化草酸转化为甲酸和CO2,是植物、微生物中促使草酸代谢降解的主要酶之一。该酶已在农业、食品、工业生产、医疗和生物监测等领域得到了广泛的应用。本文综述近年来在Oxdc来源、结构、作用以及实际应用方面的研究,着重讨论其在泌尿系统草酸盐结石病症方面的作用,为有效预防治疗泌尿系统结石症的研究提供理论参考。     

小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25（g/mL）,超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80 ℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖（Purification of intracellular polysaccharide,SCIP）,主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC₅₀分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。     

杜氏盐藻胞外多糖抗肿瘤活性及其机制研究

海藻多糖是海藻中最重要的药理活性物质之一,已成为肿瘤治疗中新的药物资源,然而,大多数微藻多糖的抗癌机制尚待阐明。为了探究杜氏盐藻胞外多糖(DsEPS)的抗肿瘤机制,本文研究了其对宫颈癌细胞(Hela)的毒性及生长的抑制作用,并利用转录组分析揭示其抗肿瘤活性作用机制。结果表明,DsEPS可抑制Hela细胞增殖,降低细胞活力,改变细胞形态。转录组分析显示,对照组和多糖组之间存在2032个差异表达基因,其中1132个上调,900个下调。基因功能富集分析结果表明,差异表达基因显著富集细胞凋亡和肿瘤相关生物过程,参与了多种癌症和凋亡相关信号通路,包括MAPK信号通路,TNF信号通路,VEGF通路,Ras信号通路等。最后构建蛋白互作网络,并从PPI网络中发现了度中心性最强10个的hub基因。本研究表明,DsEPS有抗肿瘤活性,并初步探明了其抗肿瘤机制,为以后进一步研究提供有效参考。     

《药学文献检索》课程教学的改革初探

文献检索课是高校培养学生信息素养的重要课程。根据药学专业的培养目标和教学特点,从培养学生信息意识,提高药学文献检索技能和信息利用能力为着眼点,针对药学文献检索课程教学过程中出现的问题,在教学内容、教学方法及应用训练等方面进行改革和实践,取得了良好的效果。     

宽叶金粟兰总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

目的:对宽叶金粟兰中总黄酮的提取工艺及抗氧化活性进行了研究,旨在为其开发利用提供理论依据。方法:采用微波辅助提取法对宽叶金粟兰中总黄酮的提取工艺进行优化,采用分光光度法测定提取物的还原力,并研究其对羟基自由基、DPPH自由基的清除作用。结果:最佳提取条件为:乙醇体积分数60%、料液比1∶30、微波功率300W,微波处理时间15min;在此条件下宽叶金粟兰的总黄酮提取率为6.11%。在实验浓度(0.2~0.8mg/mL)范围内,宽叶金粟兰黄酮对羟基自由基的清除率可达到100%,对DPPH自由基的清除率达到76.2%,同时还具有较强的还原能力。结论:研究结果表明宽叶金粟兰中的黄酮类物质具有较强的抗氧化活性,该植物具有一定的开发和应用前景。