皖南蝮蛇毒抑瘤组分I对人胃癌细胞SGC-7901荷瘤鼠体内抑制作用的研究

目的:研究皖南蝮蛇毒抑瘤组分I(Agkistrodon halys venom antitumor component I,AHVAC-I)对人胃癌细胞SGC-7901荷瘤鼠的体内抑制作用及瘤细胞增殖活性变化,并初步探讨其作用机制。方法: 取生长状态良好的浓度为1×10⁷个/mL的SGC-7901人胃癌细胞悬液 0.1 mL 接种于裸小鼠右侧腋窝皮下,待其成瘤后随机分为模型组、紫杉醇阳性对照组、AHVAC-I高、中、低剂量组,隔日连续给药5次,定期观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率,HE染色观察瘤体形态学变化,免疫组化SP法检测Ki-67增殖指数,原位末端标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡指数。结果: AHVAC-I在 1.0 mg/kg 剂量时对SGC-7901细胞有抑制作用,抑瘤率达 42.2%;在 3.0 mg/kg 剂量时有显著抑制作用,抑瘤率达 78.5%。实验组肿瘤内Ki-67阳性细胞数量下降,凋亡细胞明显增多。结论:AHVAC-I能明显抑制裸鼠体内SGC-7901人胃癌细胞的生长,其作用机制可能与诱导胃癌细胞发生凋亡及抑制肿瘤细胞增殖有关。     

中国皖南地区728例恶性淋巴瘤的构成分析

目的: 初步了解中国皖南地区恶性淋巴瘤的构成情况,探讨本地区恶性淋巴瘤的流行病学特点。方法: 收集皖南医学院附属弋矶山医院病理科2003.03-2012.03间诊断明确的淋巴瘤标本,全部病例经重新HE切片染色、免疫组化(Envision二步)法辅助检测,部分病例采用EBER原位杂交法(EBER-ISH)协助诊断,并参照2008版WHO关于淋巴造血组织肿瘤的分类进行组织学诊断和分型。结果: 728例中霍奇金淋巴瘤(HL)占 9.34%(68/728),非霍奇金淋巴瘤(NHL)占 90.66%(660/728),NHL中B细胞来源占 77.42%(511/660)。T/NK细胞来源占 22.58%(149/660),此外,在收集的淋巴瘤标本中,弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)占 49.73%(362/728),其余较多见的六大类型依次为结外NK/T细胞淋巴瘤61例占 8.37%,黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT)56例占 7.69%,外周T细胞淋巴瘤50例占 6.87%,套细胞淋巴瘤36例占 4.95%,经典霍奇金淋巴瘤(结节硬化型)32例占 4.40%,经典霍奇金淋巴瘤(混合细胞型)31例占 4.26%。男性433例,女性295例,男女性别比为 1.47∶1,年龄最小5岁,最大90岁,中位年龄61岁;血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤男性发病率为 86.6%(13/15)。最好发的部位依次为淋巴结、胃、肠、鼻咽部、扁桃体、涎腺、甲状腺、眼眶、骨和脾等。结论: 中国皖南地区HL以结节硬化型和混合型居多,未见"双峰性",且以原发于左颈淋巴结多见。NHL中还是DLBCL为最多见,淋巴瘤血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤男性、67岁以上发病率较高,提示恶性淋巴瘤在亚类和分类上具有明显地域性的差异。     

皖南蝮蛇毒抑瘤组分-I逆转原代胃癌相关成纤维细胞促癌作用

目的：探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分-I（agkistrodon halys venom antitumor component-I, AHVAC-I）抑制胃癌细胞迁移的生物学活性。方法：组织块培养法和胰酶消化法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞（GCAFs）；CCK8实验根据半数抑制浓度（IC50）确定AHVAC-I实验浓度；收集AHVAC-I作用GCAFs后的上清液（GCAFs-CMAHVAC-I），划痕实验法和Transwell检测GCAFs-CMAHVAC-I抑制胃癌细胞株MKN-28迁移的能力；用ELISA、RT-PCR检测AHVAC-I作用后GCAFs分泌产生的趋化因子CXCL12。结果：AHVAC-I可显著抑制人原代GCAFs分泌的CXCL12（P<0.05），AHVAC-I作用后生成的GCAFs-CMAHVAC-I明显抑制了胃癌细胞MKN-28的迁移能力（P<0.05）。 结论：AHVAC-I能够通过抑制GCAFs分泌生成的CXCL12抑制胃癌细胞MKN-28的迁移能力，逆转胃癌肿瘤微环境中的GCAFs的促进胃癌细胞转移的作用。     

皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ对人原代胃癌细胞增殖的影响

目的:探索皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ(agkis-trodon halys venom antitumor component Ⅰ, AHVAC-Ⅰ)对人原代胃癌细胞增殖的抑制和诱导发生凋亡的作用。方法:胰酶消化法分离人原代胃癌细胞,无血清培养液培养细胞和差速贴壁法纯化人原代胃癌细胞以及免疫组化法鉴定人原代胃癌细胞。采用细胞增殖和毒性检测(cell counting kit-8, CCK-8)法检测各浓度组的AHVAC-Ⅰ对胃癌原代细胞增殖抑制率。免疫组化法验证AHVAC-Ⅰ诱导人原代胃癌细胞发生凋亡和苏木素-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining, HE)法观察其形态学的变化。采用流式细胞术Annexin V/PI双染色法检测AHVAC-Ⅰ诱导人胃癌原代细胞凋亡率。结果:成功分离纯化人原代胃癌细胞7例,失败11例,免疫组化鉴定癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)和广谱角质蛋白(broad spectrum keratin protein, AE1/AE3)两种抗体均表达阳性。AHVAC-Ⅰ能够抑制人原代胃癌细胞的增殖且呈现剂量效应(P<0.01)。免疫组化检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartic protease-3, Caspase-3)表达水平随AHVAC-Ⅰ浓度的升高而升高,HE法观察随着AHVAC-Ⅰ浓度的升高细胞间隙增大、核固缩、凋亡细胞增多。流式细胞术检测人原代胃癌细胞凋亡率随AHVAC-Ⅰ浓度的增加而增加(P<0.05)。 结论:AHVAC-Ⅰ能够抑制人原代胃癌细胞的增殖和诱导人原代胃癌细胞发生凋亡,且呈剂量效应。