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目的: 建立k-ras基因突变的焦磷酸测序方法,并分析该基因在结直肠癌中的突变率。方法: 制备10份卫生部临床检验中心2013年全国k-ras基因突变检测室间质评模板DNA,对焦磷酸测序技术检测k-ras基因突变方法进行验证;制备230例结直肠癌标本gDNA,应用PyroMark Q24焦磷酸测序仪进行k-ras基因的焦磷酸测序。结果: 建立了k-ras基因突变的焦磷酸测序新方法,检测正确率100%;230例结直肠癌标本中共检出基因突变型33例,总突变率 14.34% (33/230),其中12号密码子上34G>T的突变率为 1.74%(4/230),35G>A的突变率为 5.22% (12/230),35G>T的突变率为 3.04% (7/230),37G>A的突变率为 0.43% (1/230),13号密码子上38G>A的突变率为 3.91% (9/230)。结论: k-ras基因突变的焦磷酸测序新方法具有快速、准确和高通量的优点,适合于在科研和临床基因扩增检验中推广。 相似文献
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