靶控输注异丙酚不同麻醉深度对兔脑神经元型一氧化氮合酶mRNA水平的影响

目的: 研究异丙酚不同麻醉深度对兔脑神经元型一氧化氮合酶(nNOS)mRNA水平的影响。方法: 30只日本大耳兔,随机分为3组:对照组,浅麻醉组,深麻醉组,每组10只。浅麻醉组、深麻醉组予以异丙酚靶控输注,达到所需麻醉状态后1h断头处死。对照组行耳缘静脉注射空气造成空气栓塞后致死。动物处死后0～4℃分离取脑,原位杂交法测定小脑皮质、大脑顶叶皮质nNOSmRNA表达水平。结果: 与对照组比较,异丙酚麻醉状态下明显抑制兔大脑顶叶皮质、小脑皮质nNOSmRNA表达水平(P<0.05)。随麻醉深度的加深,小脑皮质nNOS表达水平进一步明显降低(P<0.05),但大脑顶叶皮质nNOS表达水平并未进一步降低(P>0.05)。结论: 异丙酚可能通过抑制nNOS活性,降低NO、环磷酸鸟苷(cGMP)水平,从而发挥麻醉作用。异丙酚对nNOS活性的抑制存在脑区差异。     

硫喷妥钠或异丙酚麻醉不同时期大鼠脑ATP 酶和NO 合酶活性以及NO 生成量的动态变化

目的:观察硫喷妥钠或异丙酚麻醉不同时期,大鼠皮层、脑干Ca²⁺-ATPase、Na⁺, K⁺-ATPase 活性、NOS 活性和NO 生成量的动态变化。方法:大鼠腹腔注射硫喷妥钠30 mg°kg^-1 或异丙酚100 mg°kg^-1,以翻正反射消失为标准, 分别于诱导期、麻醉期, 恢复期和苏醒期断头取脑(n=8), 分离出皮层和脑干, 测定Ca²⁺-ATPase、Na⁺, K⁺-ATPase、NOS 的活性以及NO 的生成量, 腹腔注射生理盐水10 ml°kg^-1作为对照组。结果:大鼠皮层、脑干Ca²⁺-ATPase、Na⁺, K⁺-ATPase 的活性在硫喷妥钠诱导期、麻醉期和恢复期显著性降低(P<0.05 或P<0.01), 在异丙酚麻醉期亦显著性降低(P<0.05)。腹腔注射硫喷妥钠或异丙酚后, NOS 活性和NO 生成量从诱导期到恢复期均显著性降低(P<0.01), 在苏醒期可恢复至对照水平。结论:Ca²⁺-ATPase、Na⁺, K⁺-ATPase、NOS 活性及NO 的产生介导了硫喷妥钠或异丙酚的麻醉作用。     

异丙酚对大鼠脊髓背角神经元TTX敏感型钠通道失活和去失活效应的影响

目的: 观察异丙酚对急性分离的大鼠脊髓背角神经元TTX敏感型钠通道电流的影响及相关机制。方法: 取出生后7d的雄性SD大鼠,击昏后断头取脊髓腰膨大部位,分离背角神经元,应用全细胞膜片钳记录模式记录钠电流。距离神经细胞100μm施加0.3～30 μmol/L不同浓度的异丙酚,应用-10mV(持续30ms)刺激电压诱发钠电流,求出异丙酚对钠电流的半效抑制浓度(IC₅₀)。观察异丙酚对钠通道失活效应的影响时,应用从-80mV至-20mV的预刺激电压(阶差为10mV,持续30ms),再应用0mV刺激电压(持续30ms)诱发钠电流产生,向神经细胞施加IC₅₀水平的异丙酚。观察异丙酚对钠通道去失活效应的影响时,应用-10mV的预刺激电压(持续30ms),再给予-10mV、持续30ms的刺激电压诱发钠电流产生,两刺激电压的间隔时间为2～24ms。结果: 异丙酚可浓度依赖性地抑制TTX敏感型钠电流,其IC₅₀为(5.35±0.25) μmol/L。钠通道失活实验中,预刺激电压在-60mV到-40mV范围内,IC₅₀水平的异丙酚可显著抑制由刺激电压(0mV)诱发的钠电流(P<0.05)。钠通道去失活实验中,两刺激的间隔时间在2～6ms之间时,IC₅₀水平的异丙酚可显著性抑制由刺激电压(-10mV)诱发的钠电流(P<0.01,P<0.05)。结论: 异丙酚可抑制大鼠脊髓背角电压依赖性钠通道电流,这一作用与促进钠通道的失活和抑制钠通道的去失活有关。     

在非洲爪蟾卵母细胞上表达大鼠肌肉乙酰胆碱受体的方法学研究

目的:建立适合于研究肌肉松驰药作用的乙酰胆碱受体的实验模型。方法:采用磁珠技术从大鼠肌肉中提取多聚腺嘌呤mRNA, 注入去膜的非洲爪蟾卵母细胞, 表达为有功能的离子通道, 并与未去膜和去膜未注射的卵母细胞比较, 利用电压钳方法记录电压依赖性的离子通道电流, 观察并分析三组电流特性。结果:三组卵母细胞的静息膜电位和钳制到-60 mV 时的补偿电流之间无显著的统计学意义, 通过去除卵母细胞的卵泡膜可以去除内源性受体的干扰, 在注射大鼠肌肉mRNA 的卵母细胞膜上记录到典型的N₂ 型ACh 受体的电流。结论:本实验建立的模型可作为在细胞和蛋白水平研究肌松药的方法。     

异丙酚靶控输注系统研究不同麻醉深度下兔海马c-fos mRNA 水平的改变

目的:研究异丙酚不同麻醉深度对兔脑海马c-fos mRNA 水平的影响。方法:30 只日本大耳兔,随机分为3 组, 即对照组, 浅麻醉组, 深麻醉组。浅麻醉组, 深麻醉组予以异丙酚靶控输注(TCI) 达到所需麻醉状态30 min 后断头处死, 0 ～ 4 ℃ 分离取脑, 采用原位杂交法测定海马各区c-fos mRNA 表达水平。结果:与对照组比较, 海马CA1 区, 齿状回(DG) 区c-fos mRNA 表达水平随着麻醉深度的增加而显著升高(P <0.05) 。海马CA3 区未见明显变化。结论:异丙酚可能通过影响c-fos mRNA 的表达, 从而影响随后反应基因的转录而发挥抑制中枢的作用且此作用存在区域性差异。