非酒精性脂肪性肝炎动物模型的建立与应用

非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)是由单纯性脂肪肝发展至肝纤维化、肝硬化和肝癌的重要阶段。由于生活方式的改变,在我国 NASH发病率呈明显增加趋势,许多学者都在着眼于研究 NASH 病因学的预防和治疗,而建立理想NASH 动物模型是非常重要的研究工具。本文综述了国内外常用的NASH动物模型,包括营养失调性、复合因素诱导及特殊品系的脂肪性肝炎模型,详述了各种模型的造模方法及优缺点,为今后建立更稳定的动物模型提供支持。     

乙酰半胱氨酸纳米微球药动学及药效学评价

目的: 对制备乙酰半胱氨酸纳米微球进行药动学和药效学评价。方法: 尾静脉注射乙酰半胱氨酸纳米微球和乙酰半胱氨酸,不同时间检测血浆和各脏器的乙酰半胱氨酸。通过皮下注射CCl₄建立大鼠肝损伤模型,不同剂量乙酰半胱氨酸纳米微球进行治疗,检测血清学指标和肝组织各项指标评价纳米微球治疗慢性肝损伤的疗效。结果: 乙酰半胱氨酸纳米微球改变了药物在体内的分布,肝组织中药物浓度明显提高,半衰期显著增加。药效实验显示,纳米微球能降低血清学指标,提高肝组织抗氧化功能,减轻肝细胞脂肪变性、细胞浸润和坏死。结论: 乙酰半胱氨酸纳米微球具有明显肝靶向性,有利于肝损伤的药物治疗,是一种比较理想的乙酰半胱氨酸新剂型。     

乙酰半胱氨酸活性炭微囊治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的: 研究乙酰半胱氨酸活性炭微囊(activated carbon N-acetylcysteine microcapsule, ACNAC)治疗大鼠肝纤维化的疗效。方法: 以二甲基亚硝胺(dimethylnitrosoamine, DMNA)制备大鼠肝纤维化模型。将大鼠分为正常组、模型组、ACNAC高、中、低剂量组、水飞蓟宾(silibinin, SM) 组和乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)组。ACNAC以20、40、80 mg/kg (按乙酰半胱氨酸计算) 剂量每日分别灌胃进行肝纤维化治疗,给药8周后处死大鼠,通过血液生化、肝组织各项指标的测定和病理切片观察肝纤维化情况,对ACNAC治疗肝纤维化作用进行评价。结果: DMNA造模结束后,大鼠肝组织病理结果显示其肝纤维化处于Ⅲ-Ⅳ期;与模型组比较,ACNAC治疗组血清学指标显著改善;肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)、丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde, MDA)明显下降,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力显著增加;ACNAC各组Massion染色结果显示肝纤维化好转,尤其是高剂量组肝组织改善明显。结论:ACNAC对大鼠肝纤维化具有较好的治疗作用,疗效优于乙酰半胱氨酸(NAC)对照组。     

N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊对幼鼠非酒精性脂肪肝病miRNA的影响

目的: 初步研究N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊对幼鼠非酒精性脂肪肝病的保护作用,并且探讨其对miRNA及相应的靶基因的影响。方法: 采用高脂饲料喂养的方法复制幼鼠非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）模型。HE染色观察幼鼠肝组织脂肪变性程度;microRNA芯片检测肝组织的miRNA表达谱;荧光定量PCR对miRNA进行验证;采用荧光定量PCR和Western blot法对目标miRNA进行靶基因预测并进行验证。 结果: 根据检测结果,初步确定miRNA199a-5p和miRNA-378-5p是NAFLD的关键miRNA,脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,Lpl）是miRNA199a-5p的靶基因,固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory element binding proteins-1,Srebp1）、CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT enhancer binding protein alfa,C/EBP-α）是miRNA-378-5p的靶基因。结论: 推测N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊可能通过上调Lpl表达水平,下调Srebp1和C/EBP-α表达水平。这些基因与脂肪肝密切相关,可能对幼鼠NAFLD具有保护作用。     

芹菜素纳米乳抗大鼠肝纤维化作用及对MMP-1，TIMP-1的影响

目的: 观察芹菜素纳米乳对CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的作用及对基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）的影响。方法: 采用CCl₄复制大鼠肝纤维化模型,自造模之日开始,灌胃给药,1次/d,连续8周。末次给药后24 h,取大鼠血和肝脏,观察芹菜素纳米乳对血清肝功能指标（ALT、AST）、肝纤维化指标（HA、LN、Ⅲ-C、Ⅳ-C）和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、羟脯氨酸（Hyp）、MMP-1、TIMP-1水平的影响。结果: 与模型组比较,各给药组肝功能和肝纤维化均有不同程度的改善。结论: 芹菜素纳米乳对CCl4诱导肝纤维化大鼠具有一定的治疗作用,其作用可能与抗脂质过氧化反应、影响MMP-1和TIMP-1表达有关。     

乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:探讨乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:SD 大鼠70 只, 随机分成6 组:正常组(n =10, 等渗盐水灌胃和腹腔注射)、模型组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1 灌胃)、治疗组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1灌胃, 造模同时腹腔注射0.156、 0. 312、 0. 625 g/kg 乙酰半胱氨酸)、阳性对照组(n =12, 酒精8. 8 g·kg^-1·d^-1 灌胃, 造模同时腹腔注射硫普罗宁16. 5 mg/kg^-1·d^-1)。10 周末处死大鼠, 检测血清ALT、 AST 活性和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量, 观察肝组织病理变化。结果:模型组大鼠血清ALT、 AST 活性、肝组织MDA 水平较正常组升高, 肝组织GSH-PX、 SOD较正常组降低, 差异有统计学意义(P <0. 05);治疗组、阳性对照组与模型组相比,ALT、 AST、 MDA有明显的降低, 肝组织GSH-PX、 SOD 水平有明显的升高, 差异有统计学意义(P <0. 05)。HE 染色显示模型组大鼠肝细胞浆出现不同程度脂肪变性, 肝小叶可见肝细胞点状坏死, 治疗组和阳性对照组脂肪变性和炎症程度轻于模型组。结论:乙酰半胱氨酸对大鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用。