7,12-二甲基苯并蒽对人肝星状细胞活化的影响

探讨7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)对肝星状细胞活化的影响。DMBA(1μmol·L-1)处理人肝星状细胞株LX-2 24h后,Western blot、ELISA和实时定量PCR观察肝星状细胞活化标志蛋白α-SMA、TGF-β1、CYP1A1和CYP1B1蛋白表达和分泌量以及mRNA表达。研究发现,与对照组相比,DMBA处理后的LX-2中α-SMA蛋白和mRNA表达均显著升高(P0.05),TGF-β1分泌量(P0.05)和mRNA表达(P0.01)也显著升高。此外,DMBA处理的LX-2中CYP1A1和CYP1B1的mRNA表达也显著升高(P0.05)。结果表明DMBA可活化人肝星状细胞,可能与诱导LX-2中CYP1A1和CYP1B1表达有关。     

精密肝切片中乙醛活化肝星状细胞模型的建立

目的: 在精密肝切片中利用乙醛激活肝星状细胞,建立一种星状细胞激活的体外模型,为研究和筛选阻抑肝纤维化发生的药物奠定基础。方法: 利用振荡切片机制备精密肝切片,建立培养系统。以700μmol·L^-1乙醛孵育切片,培养0、2、4、6h,测定培养基和组织匀浆中谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乳酸脱氢酶(LDH)和羟脯氨酸(Hyp)含量,观察病理切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果: 与0h相比,乙醛培养2、4、6h培养基的GST、LDH漏出量均显著升高(P<0.05)。切片组织Hyp含量6h较0h相比明显升高(P<0.05)。免疫组化片镜下可见4、6h有α-SMA阳性细胞表达,图像分析显示面积和阳性率较0h明显增加(P<0.05)。结论: 精密肝切片与终浓度为700μmol·L^-1乙醛共孵育6h可活化切片中星状细胞,该技术可作为良好的体外肝星状细胞激活模型。α-SMA免疫组化是一鉴定体外星状细胞激活的可靠指标。     

不同产地杠板归总黄酮的含量测定

为建立杠板归总黄酮的含量测定方法,考察不同产地杠板归药材总黄酮的含量水平,采用分光光度法,以芦丁为对照品,以AlCl3-NaAc溶液为显色剂,检测波长为412 nm检测杠板归总黄酮含量,采用单因素法,分别研究提取溶剂体积分数、固液比、提取时间对总黄酮提取率的影响.芦丁对照品在2.55～25.5μg/mL范围内线性良好(...