索拉非尼诱导线粒体功能紊乱激活肝癌细胞氧化损伤

目的：探讨索拉非尼（sorafenib）是否能通过诱导线粒体的功能紊乱激活肝癌细胞氧化应激损伤,最终导致肝癌细胞死亡。方法：不同浓度索拉非尼处理肝癌细胞Huh7、HCC-LM3,应用CCK-8法进行细胞活力测定;利用TMRM（tetramethylrhodamine）探针测定线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）变化;利用Seahorse细胞能量代谢检测仪监测线粒体耗氧速率;采用MitoSOX（mitosox mitochondrial superoxide indicator）荧光探针测定线粒体活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平; 应用DCF-DA（dichloro-fluorescein diacetate）探针测定细胞内总ROS;通过谷胱甘肽（glutathione, GSH）预处理,观察其对索拉非尼诱导的氧化损伤及细胞死亡的恢复。结果：随着索拉非尼浓度升高,肝癌细胞Huh7、HCC-LM3的活力逐渐降低,并且抑制线粒体氧呼吸,导致氧化磷酸化的减弱及MMP的下降,最终导致线粒体及细胞质中ROS堆积从而激发细胞氧化应激损伤。而非酶抗氧化剂GSH可有效逆转索拉非尼诱导的氧化损伤和细胞死亡。 结论：索拉非尼可通过诱导肝癌细胞线粒体功能紊乱,导致ROS累积,激活细胞氧化损伤,而GSH可恢复索拉非尼诱导的氧化应激损伤。因此,通过诱发肝癌细胞谷胱甘肽的缺乏可作为增强索拉非尼疗效的治疗新方案。