依普利酮对慢性心力衰竭患者CD4+T淋巴细胞Kv1.3等通道mRNA及蛋白表达的抑制作用

目的: 探讨依普利酮（EPL）对慢性心力衰竭（CHF）患者CD4+T淋巴细胞Kv1.3等通道的mRNA及蛋白质表达的影响。方法: 收集慢性心衰Ⅱ、Ⅲ期的患者及正常人全血样本（30例vs 20例）。免疫磁珠分选外周血CD4+T淋巴细胞,利用流式细胞仪检测其纯度,CCK-8法检测不同浓度的EPL对CD4+ T淋巴细胞增殖的影响。共分为3组,Control组、CHF组及CHF+EPL组。RT-qPCR检测各组培养体系中的Kv1.3、KCa3.1和CRAC通道mRNA的表达;In-cell Western blot技术检测CD4+ T淋巴细胞膜上Kv1.3通道蛋白质的表达。结果: EPL的最佳抑制浓度为30 μmol/L;CHF组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的表达分别是Control组的10.74倍和1.20倍（P<0.01）,CHF+EPL组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的表达分别比CHF组降低了64.80%和39.62%（P<0.01）;CHF组KCa3.1和CRAC通道mRNA的表达分别是Control组的4.73倍和3.77倍（P<0.01）,CHF+EPL组KCa3.1和CRAC通道mRNA的表达比CHF组分别降低了19.30%和37.14%（P<0.01）。结论: CD4+T淋巴细胞的三种离子通道的mRNA和/或蛋白质在慢性心力衰竭情况下均有高表达,依普利酮均能明显下调三种离子通道的mRNA和/或蛋白质,其中Kv1.3通道的变化尤为突出,推测醛固酮受体拮抗剂可能通过抑制CD4+T淋巴细胞膜上的Kv1.3通道的激活,减少T淋巴细胞的活化/增殖,最终抑制CHF过程中炎症作用的发生发展而对心衰有利。     

游泳力竭对冠脉结扎致大鼠慢性心衰模型的优化

目的: 通过结合力竭运动,优化冠脉结扎造大鼠缺血性慢性心力衰竭（心衰）模型的方法,综合评价模型实效性及稳定性。方法: 成年SD大鼠40只,施冠状动脉结扎术致心肌缺血模型,4周后B超检测左心室射血分数（LVEF）,成模11只为冠脉结扎组（以LVEF<40%为模型建立标准）,>40%的22只大鼠进行1 h/d×15 d的游泳运动,以加大心脏负荷促进心衰的进展,又成模8只大鼠为结扎后力竭组。实验结束后检测心功能指标,脑钠肽（BNP）及心肌组织形态学变化,与10只空白大鼠比较各指标变化。结果: 结扎后力竭组左心室射血分数（LVEF）为（38.70±10.10）%,冠脉结扎组LVEF为（39.20±11.10）%,较Control组（84.60±3.64）%明显降低（P＜0.01）;结扎后力竭组左室舒张末压（LVEDP）为（11.5±1.3） mm Hg,冠脉结扎组LVEDP为（10.68±4.45） mm Hg,较Control组（4.4±0.2） mm Hg显著升高（P＜0.01）;结扎后力竭组血浆BNP水平为(561.0±21.0) μg/L,冠脉结扎组BNP水平为（548.6±25.8） μg/L,较Control组（366.2±21.8） μg/L显著升高（P＜0.01）。Masson染色中,Control组切片纹路清晰且红染的心肌细胞较多,而冠脉结扎组与结扎后力竭组存在大量蓝染的胶原纤维,心肌纤维明显减少成条索状。4周时成模率约为35%,经力竭运动后实验组总成模率升高至约62%,虽冠脉结扎组与结扎后力竭组各指标无统计学差异,但提高成模率效果显著（P＜0.01）。结论: 游泳力竭运动可促进冠状动脉高位结扎致缺血性慢性心衰模型的成功率,成本经济,适合推广。