密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以PCR的方法得到牛精蛋白基因的基因，去其内含子，得到牛精蛋白cDNA，克隆入原核表达载体pGEX-2T中，组装成表达载体pGEX-2T-PE，利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子（AGA或AGG）替换掉，通过基因合成得到密码子优化的牛精蛋白的基因，将其克隆入原核表达载体pGEX-2T中，组装成表达载体pGEX-2T-PS。将这两个表达载体分别转化入大肠杆菌表达菌株BL21中，经IPTG诱导，同样条件下，野生型牛精蛋白基因无法得到表达，密码子优化的牛精蛋白基因能够得到良好的表达，表达产物约占细菌总蛋白的18％，将表达蛋白纯化，进行DNA－蛋白结合实验，发现其能与DNA发生非特异性的结合。     

超高效液相色谱质谱联用仪在发酵豆乳中异黄酮分析的应用

目的:建立同时测定发酵豆乳中大豆苷、大豆苷元、染料木苷的超高效液相色谱质谱方法。方法:采用Acquity UPLC BEH C_(18)(1.7μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱进行分离,0.1%甲酸水溶液(A)与0.1%甲酸乙腈溶液(B)作为流动相,并且进行梯度洗脱。色谱柱温度35℃,进样体积5μL。质谱采用电喷雾离子源正离子模式进行采集,离子源温度100℃,脱溶剂气温度450℃,脱溶剂气流量600 L/h。结果:通过绘制大豆苷、大豆苷元、染料木苷的标准曲线,得到其线性范围分别是(4.00~100)mg/L、(0.04~100)mg/L、(0.04~100)mg/L,最低检出限分别是5.00、0.85、1.00μg/L,最低定量限分别是15.0、2.55、3.00μg/L,相关性系数范围为0.991~0.993,平均回收率范围89.50%~107.33%。研究为发酵豆乳中异黄酮的检测提供了高效、准确的方法。     

天冬多糖的结构、免疫调节活性及体外抗氧化活性

目的:探究天冬多糖的结构特征、免疫调节活性和体外抗氧化活性,为后续天冬多糖研究提供依据。方法:采用水提醇沉法提取天冬粗多糖,Sevage法脱蛋白和分级醇沉法对脱蛋白后的多组分多糖进行分离,苯酚-浓硫酸法测定其糖含量;采用高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量,高效离子色谱法测定其单糖组成;采用红外光谱法分析其结构;对于均一分子质量的80%醇沉多糖分级产物(以下简称TD-80),采用小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞RAW264.7评价TD-80的免疫调节活性及其相关细胞因子的分泌情况。通过测定DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力评价其体外抗氧化活性。结果:天冬粗多糖糖含量为63.13％,天冬脱蛋白冻干粉糖含量达73.98％。不同体积分数乙醇分级醇沉后,80%醇沉产物为均一分子质量的多糖产物TD-80(Mw = 7.3 ku,Mw/Mn = 2.68)。TD-80主要含有7种单糖组成,其中以半乳糖和半乳糖醛酸为主,属于酸性杂多糖。TD-80能促进脾淋巴细胞的增殖,并呈质量浓度依赖关系,对相关细胞因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)的分泌有一定的刺激作用,呈现一定的免疫调节活性和抗氧化活性。结论:本方法具有操作简便、结果准确等优点,可为天冬及其它类似药材中多糖的提取、纯化及药理活性研究提供参考。     

一株瑞士乳杆菌增殖培养基的优化分析

通过单因素实验、正交实验研究了不同碳源、氮源、碳氮比例、缓冲盐浓度、微量元素及其他生长因子对瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus H9)增殖培养的影响。并采用响应面法对优选的碳源、氮源和缓冲盐类的组成质量浓度进行优化,得到的增殖培养基:葡萄糖20 g/L,大豆蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,NaAC为7 g/L,K2HPO4为3 g/L,柠檬酸钠1 g/L,MgSO4.7H2O为200 mg/L、MnSO4.5H2O为81 mg/L、L-半胱氨酸0.25 g/L、吐温80为1 g/L。Lactobacillus helveticus H9在此增殖培养基中经37℃,10 h培养活菌数可达到1.34×1010mL-1,比在普通MRS中提高近35倍。     

87-1型常温去油剂

1987年10月26日,在川沙县高南电镀厂召开了由上海日用五金电镀中心研制成功的“87-1型常温去油剂”的鉴定会。鉴定会由上海二轻局科技处主持。与会专家一致认为:     

卷包车间激光导引车路径规划策略研究

以卷包车间激光导引车系统为实例,提出了激光导引车路径规划的4个基本策略即：（1）距离最短策略;（2）阻塞放行策略;（3）最大复合循环策略;（4）功能区域划分策略。在此基础上,介绍了路径规划的Ⅰ、Ⅱ级优化方法,揭示了LGV路径优化的核心思想,为提高LGV的运行效率提供了一种途径。     

营改增对建筑业的影响及应对建议

本文简要回顾了营改增的背景,从税率、抵扣、税负等方面分析了建筑业营改增对纳税人经营的影响,并从纳税人与政府两个角度对建筑业营改增提出了应对建议。     

乙二醇醚类的市场需求和生产技术进展

综述了国外乙二醇醚类的市场概况和生产技术,还介绍了我国乙二醇醚类的市场需求及生产技术新进展。     

李家峡水电站优化设计概述

李家峡水电站地质条件特别复杂 ,有滑坡体高边坡 ,软弱岩区等。在这不良地基上建造了双曲混凝土高拱坝 ,2 0 0 0 MW双排机组厂房 ,单机容量 40 0 MW水轮发电机组采用自循环蒸发冷却技术 ,采用移跨台车使双排机厂房 ,机组安装、检修共用同一启重桥机技术。     

高效液相色谱法测定发酵乳中的维生素

研究了利用高效液相色谱(HPLC)法分离测定青海省传统发酵乳中维生素B6,B2和B1的条件.结果表明,流动相为0.005mol/L烷磺酸钠-甲醇-乙酸(体积比为75:25:1).流速为1.0mL/min,检测波长为280 nm拄温为30℃时可以很好地分离测定发酵乳中的维生素B6,B2和B1质量浓度,该方法相对标准偏差小(0.45%～157%),回收率高(95.07"98.41%),线性相关系数高(r>0.999),具有较高的准确度和精确度.通过对青海省40份传统发酵乳(酸牦牛奶、酸山羊奶和酸马奶)中的维生素B6,B2和B1质量浓度测定发现,发酵乳样品之间维生素B6,B2和B1质量浓度差别较大.