基于内参系统的阪崎肠杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据阪崎肠杆菌ompA靶基因设计特异性引物和探针,并加入内参(IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法对阪崎肠杆菌基因组DNA的最低检测限为1pg;对细菌的最低检测限为1×10~4 CFU;对含有靶基因质粒的最低检测限为10~3拷贝;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R~2=0.999)。人工污染试验结果表明,在初始菌量为10CFU/25g奶粉样品时,采用水洗加试剂盒法和水煮法提取DNA,阪崎肠杆菌均在增菌10h时检出。研究结果为进一步优化和完善阪崎肠杆菌分子生物学方法的标准化提供了参考。     

牛奶中阿莫西林含量表面增强拉曼光谱检测方法的建立

以香水百合花瓣绿色合成的银溶胶为表面增强拉曼散射（SERS）活性基底，建立了牛奶中阿莫西林含量的SERS检测方法。对SERS检测条件进行了优化，考察了银溶胶浓度、银溶胶与阿莫西林溶液的体积比和氯化钠溶液的添加与否对SERS检测的影响。试验结果表明：当银溶胶浓度为106.04 μg/mL、银溶胶与阿莫西林溶液的体积比为41且不添加氯化钠的条件下，获得的SERS信号最强。在该条件下，阿莫西林标准溶液的浓度与1 055 cm^-1 处拉曼特征峰的SERS信号强度在1～1 000 μg/mL 范围内有良好的线性关系，方法的最低检出浓度可达到1 μg/mL。3份加标牛奶中阿莫西林的加标回收率为84.51%～93.62%，相对标准偏差（RSD）为5.16%。该方法简单方便，可实现牛奶中一定浓度阿莫西林的检测。