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目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究。方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Seatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,向两个反应体系分别加入1000 倍以上的a-BuTX或烟碱。不同时间取样、分离后, γ-计数仪计数。(2)13日龄的鸡胚骨骼肌N-AChR及20日龄的鸡视叶的N-AChR与125I-a-BuTX饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。另外以烟碱对125I-a-BuTX与电鳐电器官、鸡视叶、鸡胚骨骼肌N-AChR结合的竞争实验,用Logit程序计算ICso值。结果 (1) 125I-a-BuTX 与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验得到一条双曲线的Scatchard图,符合一配基两受体结合模型,求得高、低两个结合位点和两个Bmax(最大结合值)。两个体系的解离动力学均为二次解离曲线,分别求得两个解离常数和两个半衰期。(2)两种实验结果,均符合一配基一受体结合模型,分别求得一个结合位点和一个Bmax。烟碱对125I-a-BuTX电鳐电器官的N-AChR结合的竞争作用IC50 值分别为3.86X 10-5和1.65x10-1 mol。对鸡视叶的N-AChR竞争作用IC30值为6.02x107 mol,对骨骼肌竞争作用ICxo 值为4.60x 10-1。结论 (1)电鳐电器官中 存在125I-a-BuTX的高亲和力位点和低亲和力位点。(2) 125I-a-BuTX 对鸡视叶和鸡胚骨骼肌N-AChR亲和力差异显著,烟碱对a-BuTX分别与鸡视叶和鸡胚骨骼肌N-AChR竟争作用的ICo值相差7.7倍,表明鸡视叶和骨骼肌存在着两种不同的N-AChR亚型。 相似文献
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