不同浓度牛乳铁蛋白对破骨细胞活性的影响

目的研究不同浓度牛乳铁蛋白对于破骨细胞的活性的影响。方法首先通过噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度的牛乳铁蛋白对RAW264.7的细胞毒性,进而在核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of the NF-κB ligand,RANKL)(100 ng/m L)诱导下形成破骨细胞。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色法观察阳性多核细胞,检测不同浓度的牛乳铁蛋白对于破骨细胞形成的影响。通过TRAP活性检测试剂盒检测上清中的TRAP活性,及通过人工骨板观察破骨细胞的骨吸收功能。结果牛乳铁蛋白对RAW264.7细胞无毒性,对破骨细胞的形成有显著的抑制作用,并且能够显著地降低破骨细胞的活性,对破骨细胞的骨吸收活性也有抑制作用。结论牛乳铁蛋白对破骨细胞的活性有显著影响,可能会在以破骨细胞活性过度表达为特征的骨病中起到重要作用。     

国内外城镇化与生态环境协调关系动态研究

为探讨当今城镇化与生态环境的研究重点和方向,进一步丰富城镇化与生态环境协调发展的研究理论,促进城镇化、生态环境健康发展。本文通过系统梳理国内外城镇化与生态环境协调关系的理论与实证研究文献,分析目前研究现状与存在的主要问题。指出在城镇化和生态环境指标的构建上有待进一步完善、研究维度上有待进一步深化、研究尺度上有待进一步拓展,进一步明晰了城镇化与生态环境高质量发展路径,为未来该领域理论完善提供借鉴。     

基于Qβ噬菌体的A群轮状病毒装甲RNA标准参考样品的研制

目的基于Qβ噬菌体装甲RNA技术构建内含A群轮状病毒(Rotavirus,RV)检测靶标的装甲RNA(Rotavirus armored RNA,AR-RV),并开展系统的初步定值、均匀性、稳定性研究。方法人工合成核酸片段QβSNRV,该片段5'端至3'端依次为Qβ噬菌体成熟酶编码基因、衣壳蛋白编码基因、包装位点序列、RV检测靶标cDNA序列、多克隆位点序列,并将其克隆到pET-28a(+)载体中构建重组质粒pET-QβSNRV。将pET-QβSNRV转化大肠埃希菌BL21(DE3)并诱导表达,利用氯化铯密度梯度超速离心、丙烯葡聚糖凝胶层析纯化AR-RV后电镜观察,并参照GB/T 15000.3—2008《标准样品工作导则(3)标准样品定值的一般原则和统计方法》规定的方法与原则对制备的AR-RV开展定值、均匀性和稳定性研究。结果十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)结果证实重组质粒在大肠埃希菌中有目的条带表达,大小约为14.1 kDa;经氯化铯密度梯度超速离心、丙烯葡聚糖凝胶层析纯化的AR-RV无杂蛋白干扰;电镜下可见结构完整的病毒样颗粒,大小约为25 nm;定值结果显示,AR-RV中检测靶标RNA的含量为(1.02±0.3)×107copies/μl;均匀性分析结果为F=0.66F0.05(9,20),表明样品均匀性良好;稳定性结果表明,AR-RV在37℃可保存15 d、25℃可保存15 d、4℃可保存50 d、-20℃至少可保存270 d、-80℃至少可保存360 d。结论本研究基于Qβ噬菌体制备的AR-RV拷贝数高,均匀性和稳定性良好,可为RV分子检测提供安全、稳定的标准参考样品。     

蜂蜜酒发酵前后挥发性风味成分的迁移变化

目的 探究蜂蜜酒发酵前后挥发性风味成分的迁移变化。方法 本研究采用电子鼻（electronic nose,E-nose）和气相色谱-离子迁移谱联用（gas chromatography-ion mobility spectrometry,GC-IMS）技术对蜂蜜酒发酵前后挥发性风味成分的迁移变化进行比较分析。建立指纹图谱、气相离子迁移谱图,对挥发性物质进行定性分析,同时结合主成分分析（principal component analysis,PCA）比较样品间差异。结果 电子鼻检测发现发酵后甲基类物质和醇类、醛类、酮类物质明显增加;GC-IMS检测出53种挥发性物质,定性出26种挥发物质组分,发酵后2-甲基丁醛、己醛、2-甲基-1-丙醇、乙酸、乙醛、乙酸乙酯、正丙醇、丁酸乙酯、乙酸异戊酯、丁醇、3-甲基-1-丁醇、辛酸乙酯、丙烯醛和乙酸异丁酯等风味物质成分明显增加。结论 经过发酵后的蜂蜜酒在保留蜂蜜原有风味的同时又显著增加了大量新的风味成分,形成蜂蜜酒独特的风味特征。     

食源性抗凝血肽的活性作用机制及检测方法研究进展

近年来,已从各类食源性蛋白中分离鉴定出抗凝血生物活性肽。食源性抗凝血肽的活性机制主要集中在抑制凝血系统中的凝血酶的活性、除凝血酶外的其它凝血因子的活性及血小板聚集三个方面。然而,体外抗凝血活性的主要分析方法如:分光光度法、发色底物法、活化部分凝血活酶时间测定、凝血酶时间测定、凝血酶原时间测定、血小板聚集分析等均有各自优缺点。本文将对抗凝血肽的活性机制及相应的抗凝血检测分析方法进行总结分析,以期为相关研究提供理论基础。     

乳铁蛋白与牛乳中其他蛋白质相互作用机制研究进展

牛乳蛋白分为酪蛋白和乳清蛋白,其中乳铁蛋白是乳清蛋白中的一种,具有多种生物学功能,被广泛应用于食品、医药、化妆品工业等领域。在牛乳中,乳铁蛋白带正电荷,会与一些带负电荷的蛋白质,如酪蛋白、骨桥蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白等发生相互作用。这种相互作用影响着这些蛋白的生物化学功能或者分离制备特性,尤其是后者更是工业化生产中需要关注的问题。本文阐述了乳铁蛋白与牛乳中其他蛋白质之间的相互作用机制及其应用现状,对于开发乳铁蛋白的工业化制备方法、以及系统理解牛乳中各种活性蛋白间的协同生物作用等方面都具有重要意义,为乳铁蛋白生物学特性的深入研究和工业化生产技术开发提供一定依据。     

含4 种食源性病毒检测靶标多联装甲RNA的制备、纯化与定值

基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台构建同时含有诺如病毒（norovirus,NoV）、甲肝病毒（hepatitis A virus,HAV）、轮状病毒（rotavirus,RV）、星状病毒（astrovirus,AstV）检测靶标RNA的多联装甲RNA（multiplex armored RNA,AR-MulV）,并进行纯化与初步定值。结果表明,重组质粒在大肠杆菌中成功表达,表达产物大小约为14.1 kDa;制备的AR-MulV经纯化后无杂蛋白与残留重组质粒,电镜下可见大量结构形态完整的病毒样颗粒,大小约为25 nm。初步定值结果显示,AR-MulV中GI型NoV、GII型NoV、HAV、RV和AstV检测靶标RNA的含量分别为（1.24±0.2）×107、（2.54±0.6）×107、（2.24±0.3）×107、（2.96±0.5）×107 copies/μL和（3.19±0.4）×107 copies/μL。本研究基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台成功制备同时包含4 种食源性病毒标准方法检测靶标的多联装甲RNA,为食源性病毒的分子检测以及多重实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应阳性质控样品的研发提供新思路。     

不同浓度牛乳铁蛋白对成骨细胞与破骨细胞共培养的影响

研究证实牛乳铁蛋白具有成骨活性功能,既能刺激成骨细胞增殖,也能诱导破骨细胞凋亡。骨骼的生长发育是一动态平衡的生物过程,是通过成骨细胞诱导的骨生成和破骨细胞诱导的骨吸收所调节的。采用成骨细胞MC3T3-E1细胞与破骨前体细胞RAW264.7细胞1∶1的比例直接接触的共培养方式,研究不同浓度(20、100、500μg/m L)的牛乳铁蛋白对共培养中成骨细胞和破骨细胞活性以及破骨细胞骨吸收功能的影响。首先,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测共培养上清中的ALP活性,发现低浓度的牛乳铁蛋白能够抑制成骨细胞的ALP活性,而中高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地促进成骨细胞的ALP活性。利用TRAP活性检测试剂盒及ELISA检测试剂盒,则发现低中浓度的牛乳铁蛋白能够促进破骨细胞的TRAP活性,而高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的TRAP活性和共培养体系RANKL/OPG的比值。最后,通过骨吸收陷窝实验,证实了中高浓度组的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的骨吸收功能。结果表明了高浓度的牛乳铁蛋白在共培养体系中不仅能够促进成骨细胞的活性,并且对破骨细胞具有抑制活性及功能的作用。     

同方数字城市与浙江建设职业技术学院校企联合共推楼宇智能化人才培养计划

<正>本刊讯近日,浙江建设职业技术学院楼宇智能专业一体化发展联盟成立大会召开,作为联盟的发起和主要成员单位之一,同方数字城市与会并出席了同方智能建筑系统集成认证(华东)培训基地、清华同方-浙江建院共建实训室及"建筑电气与智能化"工作室挂牌仪式、"浙江建院1+X企业联合学院"的揭牌仪式。浙江建设职业技术学院是浙江省唯一一所公办建设类全日制高等职业学院,联盟成立大会在该校图书馆报告厅     

基于模糊一致判断矩阵的设计变更传播CPM模型

在产品的概念设计阶段,针对产品设计过程中组件变化引起的变更传播问题,建立CPM(Change Prediction Method)模型;采用模糊一致判断矩阵计算CPM模型中变更可能性和变更影响,分析组件变更传播风险,减少CPM模型中主观性带来的不确定性;结合仿人形机器人腿部的概念设计实例建立CPM模型,并通过CPM模型预测设计组件变化的传递过程和变化路径。