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目的 :以血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA为模板,克隆构建HBV X蛋白质的真核表达载体pcDNA-HBx。方法 :设计扩增HBV X基因的In-Fusion PCR引物,采用高保真DNA聚合酶分两段扩增HBV X基因序列;采用In-Fusion克隆技术,将两段X基因扩增片段一步克隆入经Hind III和Xba I双酶切的pcDNA3.0真核表达载体,以构建重组真核表达载体pcDNA-HBX;采用Hind III和Xba I双酶切和DNA序列测序筛选鉴定重组载体;pcDNAHBx转染HepG2细胞,Western blot检测pcDNA-HBx转染细胞的HBx蛋白质表达。结果 :InFusion PCR引物分两段扩增获得全长HBx基因序列;In-Fusion获得克隆的pcDNA-HBx经双酶切筛选得到阳性重组质粒,测序分析证实插入序列正确;转染pcDNA-HBX的HepG2细胞,Western blot证实表达HBx蛋白质。结论 :以血清HBV DNA为模板克隆HBV X基因,构建了表达HBV HBx蛋白质的真核表达载体,为HBx蛋白质的生物学功能研究提供支持。 相似文献
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雷达测得的距离信息不需要转化,可直接用于目标定位,具有较高的精度,但高空中的大气折射会给测距带来干扰,降低目标的定位精度。本文利用3R定位模型确定出目标的理想空间位置;与考虑大气折射影响后进行改进的等效地球半径模型相结合,进行海拔高度的求解;将三站计算的海拔高度进行不同的加权处理,得出目标处于不同高度下的大气折射修正值。仿真结果表明,该方法改善和提高了系统对目标的定位精度,进一步增强了系统的作战能力。 相似文献
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